SRS-82 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠腹水瘤细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

HKC细胞类似产品：：SW-982细胞、PL9细胞、BL1339细胞

DU145细胞类似产品：：RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞

MCF7ADR细胞类似产品：：SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞

U 937细胞类似产品：：EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞

Walker256-TC细胞类似产品：：WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

CMT.64细胞类似产品：：Mv.1.Lu细胞、NCI-H2135细胞、Mel-RM细胞

HCC1395细胞类似产品：：COLO-829细胞、3T6细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞

HTR-8/SV neo细胞类似产品：：BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞

MRC-V细胞类似产品：：Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞

SK-N-BE-2c细胞类似产品：：H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

SRS-82 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠腹水瘤细胞

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

SCC090细胞类似产品：：A673细胞、MOLM13细胞、Lewis Lung细胞

RLE-6TN细胞类似产品：：C3H10T1/2CL8细胞、U-251MG细胞、RWPE-1细胞

Roswell Park Memorial Institute 1846细胞类似产品：：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞

TGHAVSMC细胞类似产品：：HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞

Hs611T细胞类似产品：：B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞

H-226细胞类似产品：：RSC96细胞、CAL 62细胞、NCI-H28细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

DR2R 1610细胞类似产品：：GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞

Panc-08.13细胞类似产品：：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞

SW 837细胞类似产品：：NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞

NCIH2023细胞类似产品：：CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞

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VK2/E6E7细胞类似产品：：ESC细胞、H660细胞、C17细胞

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SUM52PE细胞类似产品：：AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞

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A3细胞类似产品：：SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞

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Me-Wo细胞类似产品：：CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞

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L-Wnt3A细胞类似产品：：Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞

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LAD-2细胞类似产品：：293FT细胞、PLC-PRF-5细胞、TB1 Lu细胞

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M-07e细胞类似产品：：KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞

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PCI-4.2细胞类似产品：：CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞

KS-SLK细胞类似产品：：SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞

SNU449细胞类似产品：：BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞

ATN-1细胞类似产品：：Kit 225细胞、EMT-6细胞、H1915细胞

HPB-ALL细胞类似产品：：Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞

Neuro 2a细胞类似产品：：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞

Wayne State University-Head and Neck 13细胞类似产品：：NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞

H-1648细胞类似产品：：OVCAR-3细胞、MLMEC细胞、CPA47细胞

H-889细胞类似产品：：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞

KOSC-2 cl3-43细胞类似产品：：Calu6细胞、YD38细胞、Colon 26细胞

SHI1细胞类似产品：：RAG细胞、HCC1954 BL细胞、U-373MG细胞

SW 837细胞类似产品：：NCIH2122细胞、MAVER细胞、GM3570细胞

EoL-1 cell细胞类似产品：：Sp2/0-Ag-14细胞、P36细胞、OVCAR-8细胞

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