A-172 Cells(赠送Str鉴定报告)|人脑胶质母细胞

"A-172 Cells(赠送Str鉴定报告)|人脑胶质母细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：贴壁

AA-Mel细胞类似产品：：SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞

MDAMB435细胞类似产品：：NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞

MDA-MB-435S细胞类似产品：：Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞

HSC-2细胞类似产品：：Hs-578-T细胞、EPC细胞、MPC-11细胞

SU-DHL-10细胞类似产品：：BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

RPMI-2650细胞类似产品：：BC-021细胞、NHLF细胞、H-1648细胞

MeWo细胞类似产品：：OCI-Ly3细胞、HBVSMC细胞、OPM-2细胞

PG-LH7细胞类似产品：：RSMC细胞、T/GHA-VSMC细胞、CAL 78细胞

M210B4细胞类似产品：：BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞

CL1.0细胞类似产品：：COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

NCI-H524细胞类似产品：：DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞

WiDr/S细胞类似产品：：WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞

NCI-H1838细胞类似产品：：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞

SJSA-1细胞类似产品：：PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞

PC-3M细胞类似产品：：Murine Lung Epithelial-12细胞、NCIH128细胞、8226/S细胞

SupB15W细胞类似产品：：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

H64细胞类似产品：：EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞

hUC-MSC细胞类似产品：：NCIH378细胞、CHO-ori细胞、MXI细胞

KPL-1细胞类似产品：：GM2219C细胞、WC00044细胞、Hs 940.T细胞

MTEC1细胞类似产品：：HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞

Hs 675.T细胞类似产品：：PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞

P3X63Ag8653细胞类似产品：：A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞

CAL-85-1细胞类似产品：：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞

Panc05.04细胞类似产品：：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞

SNU1040细胞类似产品：：16HBE14o-细胞、PLA-801D细胞、RSC 96细胞

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HS-294-T细胞类似产品：：HSAEC1-KT细胞、TC-1[JHU-1]细胞、TALL1细胞

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LS-174T细胞类似产品：：H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞

MGH-U3细胞类似产品：：RC-K8细胞、AR4-2J细胞、PANC1005细胞

G 292 Clone A 141B1细胞类似产品：：T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞

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Molm 14细胞类似产品：：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞

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MDA-MB-134-VI细胞类似产品：：MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞

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67NR细胞类似产品：：Hs839T细胞、H2195细胞、LLCMK2细胞

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Sup T-1细胞类似产品：：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞

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HT1080细胞类似产品：：PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞

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SW 780细胞类似产品：：Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞

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624 MEL细胞类似产品：：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞

SK-HEP-1细胞类似产品：：SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞

SNU-739细胞类似产品：：A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞

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N87细胞类似产品：：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞

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KM933细胞类似产品：：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞

H-1876细胞类似产品：：DHL-6细胞、SNU-182细胞、AML-193细胞

MKN1细胞类似产品：：MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞

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KYSE-30细胞类似产品：：95-D细胞、NCTC929细胞、3T3 L1细胞

H520细胞类似产品：：EoL-1 cell细胞、NCIH660细胞、MLA-144细胞

SNU-216细胞类似产品：：MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞

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L5178YR细胞类似产品：：D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞

UACC893细胞类似产品：：H-841细胞、HEK-293FT细胞、CCRF-CEM/S细胞

Ect1/E6E7细胞类似产品：：NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞

M-NFS-60细胞类似产品：：ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞

A549-Taxol细胞类似产品：：MLM细胞、KYSE410细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞

Hs839.T细胞类似产品：：SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞

MAD109细胞类似产品：：Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞

EOC 20细胞类似产品：：SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞

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Huh7.5.1细胞类似产品：：H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞

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MOLT3细胞类似产品：：NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞

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Z138细胞类似产品：：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞

MGC803细胞类似产品：：A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞

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Caco2-BBE细胞类似产品：：Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞

McARH7777细胞类似产品：：NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞

Kuramochi细胞类似产品：：OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞

A-172 Cells(赠送Str鉴定报告)|人脑胶质母细胞

Med 341细胞类似产品：：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞

NCIH2286细胞类似产品：：IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞

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Pt K1细胞类似产品：：Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞

SCL II细胞类似产品：：IBRS-2细胞、HO-8910细胞、J774.A1细胞

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GT38细胞类似产品：：TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞

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H2228细胞类似产品：：Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、N87细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞

B16 F10细胞类似产品：：A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞

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