NCI-H64 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

Kit225-K6细胞类似产品：：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞

T241细胞类似产品：：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞

BC-024细胞类似产品：：MGH-UI细胞、SUM 159细胞、MV-1-Lu细胞

H2029细胞类似产品：：CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞

HSAS4细胞类似产品：：A 2058细胞、C8166细胞、MDA-MB-134VI细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

D324细胞类似产品：：IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞

SW 839细胞类似产品：：EL 4细胞、TT细胞、FU-97细胞

End1/E6E7细胞类似产品：：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞

NCIH2227细胞类似产品：：OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞

SCC 9细胞类似产品：：MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

NCI-H64 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺癌细胞

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

Y3细胞类似产品：：KLN205细胞、MuM-2B细胞、hRMECs细胞

MC/CAR细胞类似产品：：A-2058细胞、A 72细胞、WEHI 3B细胞

RBL.2H3细胞类似产品：：BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞

EST50细胞类似产品：：CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞

MKN-7细胞类似产品：：KM12 SM细胞、108CC15细胞、NR-8383细胞

NCIH1355细胞类似产品：：HMSC细胞、D341细胞、T. T细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

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MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞类似产品：：HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞

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SKMEL-2细胞类似产品：：M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞

SF-295细胞类似产品：：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞

Tu-212细胞类似产品：：SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞

Hs 606细胞类似产品：：L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞

RSC-364细胞类似产品：：NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞

CMT167细胞类似产品：：NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞

149PT细胞类似产品：：MOLT-4细胞、NCIH2405细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞

Hs 274细胞类似产品：：CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞

SKES1细胞类似产品：：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞

Mahlavu细胞类似产品：：Sp2/0-Ag14细胞、MB468细胞、HO-1-N-1细胞

H295细胞类似产品：：T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞

WERI-Rb 1细胞类似产品：：C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞

HepaRG细胞类似产品：：Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞

MKN74细胞类似产品：：AtT20细胞、SW.620细胞、KYSE 180细胞

NB-19细胞类似产品：：HREC细胞、NP69细胞、16-HBE细胞

ReNcell CX细胞类似产品：：HM06.A1细胞、NCIH2122细胞、Pro-5WgaRI3C细胞

G 401细胞类似产品：：NTERA-2 clone D1细胞、KRC/Y细胞、SP2/0 Ag-14细胞

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