RL-65 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肺上皮细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

HEK293FT细胞类似产品：：U-87-MG细胞、251MG细胞、B16F10细胞

D-324 Med细胞类似产品：：NCI-SNU-182细胞、HCT-116细胞、H2066细胞

EA.Hy926细胞类似产品：：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞

SKMES1细胞类似产品：：MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞

UPCI-SCC-90细胞类似产品：：OCI AML4细胞、SU-DHL-10细胞、HCCC-9810细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HT-1376细胞类似产品：：SUSM1细胞、NCI-H716细胞、KBM7细胞

H676B细胞类似产品：：CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞

KM.12细胞类似产品：：HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞

HSC2细胞类似产品：：HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞

HL-60细胞类似产品：：Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

Hs 445细胞类似产品：：OP9细胞、TK.10细胞、H-1963细胞

MT-2J细胞类似产品：：SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞

HCT GEO细胞类似产品：：ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞

H9c2(2-1)细胞类似产品：：MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞

SUIT2细胞类似产品：：rRMECs细胞、PG-4(S+L-)细胞、CHO Lec1细胞

NCI-H865细胞类似产品：：SU-DHL-6细胞、AZ-521细胞、SU-DHL-2细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

686LN-M4e细胞类似产品：：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞

H250细胞类似产品：：VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞

HepG2/C3A细胞类似产品：：SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞

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H64细胞类似产品：：EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞

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HOS TE 85细胞类似产品：：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞

G 292 Clone A 141B1细胞类似产品：：T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞

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RL95-2细胞类似产品：：Clone 166细胞、GM03570细胞、Molm 13细胞

UCLA SO M14细胞类似产品：：H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞

LAPC4细胞类似产品：：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞

NCI-UMC-11细胞类似产品：：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞

PC 61.5.3细胞类似产品：：alpha TC1 clone 6细胞、SK-MEL-MeWo细胞、U-251-MG细胞

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SNU182细胞类似产品：：U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞

MRMT-1细胞类似产品：：HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞

OCI-Ly10细胞类似产品：：RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞

C-Lu65细胞类似产品：：MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞

LAN-6细胞类似产品：：H82sclc细胞、207细胞、CFPAC细胞

Tu686细胞类似产品：：UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞

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K-1735细胞类似产品：：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞

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Rat Fetal Lung-6细胞类似产品：：JB6 [Mouse]细胞、HUV-EC-C细胞、SK-MEL-2细胞

RL-65 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肺上皮细胞

1.1B4细胞类似产品：：LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞

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FM88细胞类似产品：：BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞

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GMK,BSC-1细胞类似产品：：TE 85 ClF-5细胞、HEK-AD293细胞、HARA-B细胞

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GL-261细胞类似产品：：Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞

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Bowes melanoma cells细胞类似产品：：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞

COR-L105细胞类似产品：：HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞

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MC3T3E1细胞类似产品：：Panc10.05细胞、RH7777细胞、UT7细胞

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DR2R1610细胞类似产品：：253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞

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HSC-T6细胞类似产品：：Hs742T细胞、MM6细胞、HOC-1细胞

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RL-65 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肺上皮细胞

TW-039细胞类似产品：：RT-4细胞、102PT细胞、GalK 1细胞

FOX-NY细胞类似产品：：A-875细胞、C8161细胞、MLO-Y4细胞

NRK clone 49F细胞类似产品：：H322T细胞、OVCA-420细胞、OE21细胞

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