RFL-6 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠成纤维细胞

"RFL-6 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠成纤维细胞

细胞背景资料：胚肺；成纤维细胞；SD大鼠

细胞形态：成纤维细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

MN 60细胞类似产品：：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞

P388.D1细胞类似产品：：SKHEP1细胞、BT 549细胞、U-87MG ATCC细胞

MDCK-II细胞类似产品：：C-Lu-65细胞、MN-60细胞、HCC94细胞

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H-676细胞类似产品：：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

SK-N-BE(1)细胞类似产品：：AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞

PC.3细胞类似产品：：SK-NM-C细胞、AZ 521细胞、SK-NM-C细胞

SK-NEP-1细胞类似产品：：SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞

PANC0203细胞类似产品：：SK-BR3细胞、SNU423细胞、HeLa 229细胞

SK-MEL-2-LUC细胞类似产品：：VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

RFL-6 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠成纤维细胞

细胞生长特性：贴壁

U118MG细胞类似产品：：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞

OCUM-1细胞类似产品：：MDA-MB-157细胞、NCI-H1666细胞、HEK (AD293)细胞

McG-1细胞类似产品：：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞

LCLC103H细胞类似产品：：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞

NFHIOSE-80细胞类似产品：：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞

SCC-25细胞类似产品：：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

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LTEPa2细胞类似产品：：SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞

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SUM 149细胞类似产品：：Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞

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JB6 [Mouse]细胞类似产品：：NRK49F细胞、CL1-5细胞、ST-2细胞

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H-2405细胞类似产品：：Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞

OE-33细胞类似产品：：MEC1细胞、Hs 934.T细胞、KM12 SM细胞

HEK293-A细胞类似产品：：UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞

CCC-HSF-1细胞类似产品：：McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞

253J B-V细胞类似产品：：MNNG/HOS Cl #5细胞、HEC-1A细胞、H838细胞

BMSC/hBMSCs细胞类似产品：：NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞

KNS-81细胞类似产品：：H-1876细胞、B16-F10细胞、H1734细胞

RCK8细胞类似产品：：HCC-1954BL细胞、58F细胞、SNB19细胞

GES1细胞类似产品：：HEK293FT细胞、RL-952细胞、CORL279细胞

GM00346细胞类似产品：：PC-3M 2B4细胞、HUT28细胞、UM-UC14细胞

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