2BS Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肺成纤维细胞

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细胞背景资料：胚肺；成纤维细胞；女性

细胞形态：成纤维细胞样

解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提GAO未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。

细胞生长：贴壁

Jurkat Clone E6-1细胞类似产品：：CNE2Z细胞、D-324MED细胞、RIN-m细胞

Eph4 1424细胞类似产品：：HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞

B16F0细胞类似产品：：HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞

Mel-624细胞类似产品：：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞

A-9细胞类似产品：：LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞

2BS Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肺成纤维细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

MZ-CRC-1细胞类似产品：：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞

HLE-SRA-01/04细胞类似产品：：Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞

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Toledo细胞类似产品：：G-361细胞、H-295细胞、KP4细胞

MCF-7/ADR细胞类似产品：：CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

TKB-1细胞类似产品：：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞

P3X63 AG 8.653细胞类似产品：：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞

NCI-SNU-449细胞类似产品：：MDA-MB-330细胞、D-341Med细胞、EOC20细胞

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GTL 16细胞类似产品：：FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞

PA I细胞类似产品：：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

TGW-I-nu细胞类似产品：：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞

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NK62a细胞类似产品：：OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞

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Pt K2 (NBL-5)细胞类似产品：：NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞

DoHH-2细胞类似产品：：MSCs（mUCMSCs）细胞、Lung cancer-1/squamous细胞、RAW264.7细胞

BHT-101细胞类似产品：：MSTO211H细胞、Y3.AG.1.2.3细胞、MLO-Y4细胞

HSKMC细胞类似产品：：C8166-CD4细胞、NCI-H187细胞、Pa17C细胞

HS-729细胞类似产品：：Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、KYSE 140细胞、BNL CL2细胞

GM00637细胞类似产品：：HUT125细胞、NUGC4细胞、G 292 Clone A 141B1细胞

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