CCD-19Lu Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺成纤维细胞

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细胞背景资料：肺成纤维细胞；女性

细胞形态：成纤维细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

RBL-2H3细胞类似产品：：EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞

CL1-5细胞类似产品：：HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞

MADB106细胞类似产品：：JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞

He La细胞类似产品：：C81-61细胞、EST50细胞、M210B4细胞

MFM-223细胞类似产品：：SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞

CCD-19Lu Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺成纤维细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

EJ1细胞类似产品：：SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞

NK-92.05细胞类似产品：：32D-Cl3细胞、H1573细胞、NCI-H146细胞

HTh74细胞类似产品：：NCI-H1568细胞、KG1A细胞、KY-50细胞

HCC-38细胞类似产品：：KLM1细胞、KE39细胞、SW-756细胞

MDCC-MSB1细胞类似产品：：GA10细胞、CHO Lec1细胞、KE-37细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞类似产品：：GM17219细胞、UACC-812细胞、D-324 Med细胞

LK 2细胞类似产品：：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞

EA.Hy926细胞类似产品：：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞

CWR22Rv1细胞类似产品：：NCI-H2110细胞、Det 562细胞、HME-1细胞

MDA MB 361细胞类似产品：：H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞

OVCA433细胞类似产品：：EC-9706细胞、JCA-1细胞、NCI-H2029细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿HAO隔离衣，戴HAO口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。

B16-F0细胞类似产品：：Hs737T细胞、AK细胞、HOEC细胞

SF 767细胞类似产品：：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞

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HeLa S3细胞类似产品：：NCI-H82细胞、H676B细胞、Mink细胞

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HEP-3B2细胞类似产品：：CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞

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MonoMac1细胞类似产品：：HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞

J82 COT细胞类似产品：：TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞

CCF-STTG1细胞类似产品：：MT-2J细胞、ME 180细胞、NCI-H1184细胞

A549-Taxol细胞类似产品：：MLM细胞、KYSE410细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞

Blotchy fibroblast-11细胞类似产品：：Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞

CCC-HSF-1细胞类似产品：：McArdle RH-7777细胞、SW 1463细胞、CCD1095Sk细胞

GM03569B细胞类似产品：：NCI-H1819细胞、NUGC-2细胞、EBC-1/original细胞

OV 2008细胞类似产品：：FOXNY细胞、HFLS-RA细胞、MKN1细胞

GM02219C细胞类似产品：：Hs 683.T细胞、PK(15)细胞、NCI-H774细胞

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