HFL-I Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肺成纤维细胞

"HFL-I Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肺成纤维细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：成纤维细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：贴壁

CCD 966SK细胞类似产品：：MS 751细胞、DHL8细胞、TGBC11TKB细胞

COLO-HSR细胞类似产品：：H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞

bEND.3细胞类似产品：：ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞

MM.1S细胞类似产品：：HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞

TE10细胞类似产品：：V-79-4细胞、GM12878细胞、MPC5细胞

HFL-I Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肺成纤维细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

ONS76细胞类似产品：：TCam 2细胞、He-La细胞、MG63细胞

CMT64细胞类似产品：：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞

HCT-15细胞类似产品：：HEK293E细胞、J-82细胞、U373 MG细胞

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Hs 688(A).T细胞类似产品：：SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

HCC4006细胞类似产品：：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞

V79-GalK1细胞类似产品：：GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞

LU65细胞类似产品：：130 T细胞、H2405细胞、SW 1573细胞

DMS114细胞类似产品：：LL/2细胞、Nb 2细胞、HCC-9204细胞

H1703细胞类似产品：：DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞

CCD841CoTr细胞类似产品：：A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

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SK-BR-3细胞类似产品：：KMS11细胞、CAMA-1细胞、OVCAR 432细胞

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PC-3M-2B4细胞类似产品：：GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞

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B16BL6细胞类似产品：：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞

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NCI-SNU-520细胞类似产品：：SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞

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M109细胞类似产品：：JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞

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BpRcl细胞类似产品：：HTR-8/SV neo细胞、NCI-H508细胞、ARH 77细胞

CHO细胞类似产品：：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞

TCMK-1细胞类似产品：：L-02细胞、LM1细胞、NCIH28细胞

SNK6细胞类似产品：：BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞

P3X63 AG 8.653细胞类似产品：：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞

HCC78细胞类似产品：：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞

Lewis lung carcinoma细胞类似产品：：Duck embryo细胞、293H细胞、WERI-Rb1细胞

OP-9细胞类似产品：：MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞

HSC5细胞类似产品：：SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞

Me Wo细胞类似产品：：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞

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