MEG-01 Cells(赠送Str鉴定报告)|人成巨核细胞白血病细胞

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细胞背景资料：MEG-０１细胞株源自一位CML患者成巨核细胞转换期的骨髓细胞。细胞质因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa，-Schiff(PAS)反应，α醋酸酯酶和酸性酶阳性。髓过氧化物酶，α酯酶，化醋酸AS-D酯酶和碱性酶阴性。用单克隆抗体BA-１(抗B细胞，粒性白细胞)，HPL-３(抗球蛋白IIb/IIIa)和２０.３(抗单核细胞，血小板)染色成阳性。其他淋巴和骨髓类抗体成阴性。

细胞形态：淋巴母细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：悬浮

PG-BE1细胞类似产品：：H-1792细胞、SUPT-1细胞、H510A细胞

RT 112细胞类似产品：：PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞

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H-345细胞类似产品：：V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞

MEG-01 Cells(赠送Str鉴定报告)|人成巨核细胞白血病细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２传代。３天内可长满。

Swiss 3T3细胞类似产品：：JROECL 19细胞、624细胞、HNE2细胞

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细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

MEG-01 Cells(赠送Str鉴定报告)|人成巨核细胞白血病细胞

细胞生长特性：悬浮生长

CEM T4细胞类似产品：：DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞

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HS-766-T细胞类似产品：：HuCCT-1细胞、COLO 394细胞、ONS-76细胞

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BE(2)C细胞类似产品：：SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞

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细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

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MC3T3-L1细胞类似产品：：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞

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18G3.cl 1细胞类似产品：：SNU-216细胞、NCI H157细胞、SKGIIIA细胞

LC2/Ad细胞类似产品：：RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞

HL-1细胞类似产品：：HK-2 [Human kidney]细胞、H1792细胞、OCI-Ly7细胞

GFP-Olig2细胞类似产品：：hTERT-RPE细胞、AML 12细胞、NCIH1618细胞

H820细胞类似产品：：CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞

2PK-3细胞类似产品：：OC-3-VGH细胞、MLA 144细胞、A 2780 CP细胞

HEK293FT细胞类似产品：：U-87-MG细胞、251MG细胞、B16F10细胞

MOLM16细胞类似产品：：16-HBE14o细胞、CEM-CCRF细胞、HSF细胞

COS1细胞类似产品：：Pa14C细胞、H-1373细胞、YT细胞

K562/ADR细胞类似产品：：LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞

210RCY3-Ag1.2.3细胞类似产品：：C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞

16HBE14o-细胞类似产品：：Panc 3.27细胞、16HBEo-细胞、RPMI.8226细胞

EST50细胞类似产品：：CCD-1095Sk细胞、CHL-IU细胞、SK-N-AS细胞

MRCV细胞类似产品：：NCI-H524细胞、786O细胞、HEL299细胞

GM05862细胞类似产品：：OV90细胞、Panc10.05细胞、ECC-1细胞

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