Ku812F Cells(赠送Str鉴定报告)|人外周血嗜碱性白血病细胞

"Ku812F Cells(赠送Str鉴定报告)|人外周血嗜碱性白血病细胞

细胞背景资料：慢性粒细胞白血病；男性

细胞形态：淋巴母细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：悬浮

HS-294细胞类似产品：：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞

JROECL19细胞类似产品：：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞

Molm 14细胞类似产品：：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞

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MHCC 97-H细胞类似产品：：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H1793细胞类似产品：：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞

A2780/CP细胞类似产品：：HGC-27细胞、Hs-746T细胞、SNU-601细胞

293T细胞类似产品：：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞

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SW 1573细胞类似产品：：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮

ETCC007细胞类似产品：：VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞

OKAC1细胞类似产品：：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞

HeLa S-3细胞类似产品：：HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞

MDCK细胞类似产品：：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞

NCI-H929细胞类似产品：：S3-HeLa细胞、Glioma 261细胞、NCI-H865细胞

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购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿HAO隔离衣，戴HAO口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。

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T-47D细胞类似产品：：149 PT细胞、HT115细胞、BCaP-37细胞

HSC-I细胞类似产品：：NCI-H69细胞、Co 205细胞、HKC细胞

SU-DHL6细胞类似产品：：HuT78细胞、SNU-620细胞、THLE2细胞

Oregon J-111细胞类似产品：：RGC6细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、CEM.C1细胞

QG56细胞类似产品：：EVSA/T细胞、WEHI164细胞、F81细胞

H1563细胞类似产品：：CV-1细胞、SUM149细胞、HPAF-II细胞

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