EHEB Cells(赠送Str鉴定报告)|人慢性B细胞白血病细胞

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细胞背景资料：B细胞白血病；女性

细胞形态：淋巴母细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：悬浮

QBI-HEK 293A细胞类似产品：：EU-2细胞、MN9D细胞、CHAGOK1细胞

NCI-H2347细胞类似产品：：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞

Japanese Tissue Culture-28细胞类似产品：：HuH-28细胞、Pa18C细胞、Molm14细胞

HT 1080.T细胞类似产品：：SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞

C-33 A细胞类似产品：：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

MDA-MB 453细胞类似产品：：LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞

EBNA-293细胞类似产品：：SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞

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OV-CA 432细胞类似产品：：KLM-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞、OP-9细胞

H-7721细胞类似产品：：TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮

C-28/I2细胞类似产品：：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞

NTERA2细胞类似产品：：NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞

SKBr3细胞类似产品：：Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞

MADB-106细胞类似产品：：MNNG/HOS Clone F-5细胞、MUTZ-1细胞、Caov-3细胞

ZR7530细胞类似产品：：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞

GOTO细胞类似产品：：MTC-TT细胞、OV 1063细胞、KRC-Y细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

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HCC202细胞类似产品：：NKM1细胞、WEHI 164 TC细胞、SUDHL16细胞

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HCT15细胞类似产品：：P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞

S91细胞类似产品：：EFM192细胞、Walker-256细胞、MDAMB134细胞

Human Liver-7702细胞类似产品：：JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞

HPAF细胞类似产品：：Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞

TKB1细胞类似产品：：Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞

SK-N-BE细胞类似产品：：ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞

AML-2细胞类似产品：：OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞

Ly8细胞类似产品：：Vx-2细胞、HR1K细胞、3T3-Swiss albino细胞

16HBE细胞类似产品：：MC38细胞、Hs 729.T细胞、H-35 Reuber细胞

C28/I2细胞类似产品：：CHO/dhFr-细胞、SK_HEP1细胞、HSKMC细胞

H-157细胞类似产品：：MV4;11细胞、BL6细胞、293-EBNA1细胞

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