MDCC-MSB1 Cells(赠送Str鉴定报告)|鸡淋巴瘤细胞

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细胞背景资料：淋巴瘤

细胞形态：淋巴母细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：悬浮

KBM-7细胞类似产品：：KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞

Cloudman M3细胞类似产品：：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞

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MEL-526细胞类似产品：：Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞

MDA175细胞类似产品：：SK-MEL28细胞、HN6细胞、MDA-MB-435细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

RPMI-1788细胞类似产品：：NCIH1693细胞、LK2细胞、SCC-1395细胞

SK-ML2细胞类似产品：：COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞

Medical Research Council cell strain-5细胞类似产品：：SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞

293 HEK细胞类似产品：：FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞

SU-DHL-5细胞类似产品：：WiDr-TC细胞、PC3-M细胞、MCA 38细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮

LAD 2细胞类似产品：：GC-1细胞、SN4741细胞、Hs 746T细胞

TE-9细胞类似产品：：DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞

MCF.10A细胞类似产品：：HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞

L929细胞类似产品：：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞

MHCC-97细胞类似产品：：U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞

NBL-1细胞类似产品：：LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

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HSC（Human Schwann）细胞类似产品：：CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞

Loucy细胞类似产品：：Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞

Rat Chondrosarcoma Swarm细胞类似产品：：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞

Anglne细胞类似产品：：COC1/CDDP细胞、HO-8910 PM细胞、GM03573细胞

SKRC20细胞类似产品：：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞

UPCISCC154细胞类似产品：：FTC133细胞、SK-N-BE(1)n细胞、138 MG细胞

Hs 578.Bst细胞类似产品：：H-2107细胞、MPC-5细胞、HL-60细胞

IM-95细胞类似产品：：A-204细胞、AMJ2-C8细胞、JB6 Cl 30-7b细胞

MDA-134细胞类似产品：：CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞

SkMel31细胞类似产品：：CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞

B16 melanoma F10细胞类似产品：：NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞

C17.2细胞类似产品：：U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞

SK-MEL-2细胞类似产品：：SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞

SV40-MES13细胞类似产品：：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞

GM03320细胞类似产品：：SK.OV.3细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、293细胞

Kupffer细胞类似产品：：Hs-729-T细胞、KNS62细胞、NCI H157细胞

SK-GT-2细胞类似产品：：D-407细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Adeno-293细胞

H-1666细胞类似产品：：SNU-251细胞、SNU387细胞、OCI-LY-7细胞

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