NKM-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人白血病细胞

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细胞背景资料：急性髓系白血病；男性

细胞形态：淋巴母细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：悬浮

HS-5细胞类似产品：：HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞

Ocular Choroidal Melanoma-1细胞类似产品：：XuanWei Lung Cancer-05细胞、A375-SM细胞、CHP 212细胞

HANK-1细胞类似产品：：HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞

FHCRC-11细胞类似产品：：Metastatic Variant-522细胞、SupT1细胞、NCI-H2227细胞

mousepodocyte细胞类似产品：：HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞

NKM-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人白血病细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

GM03569B细胞类似产品：：NCI-H1819细胞、HCC1588细胞、MOLT 3细胞

RMC-1细胞类似产品：：VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞

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NCTC 929细胞类似产品：：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞

HOP 92细胞类似产品：：WiDr/S细胞、624mel细胞、DI-TNC1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮

CW-2细胞类似产品：：NCIH2066细胞、C-4 I细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞

SUM 149细胞类似产品：：Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞

MDA468细胞类似产品：：QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞

PC-14细胞类似产品：：SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞

A-72细胞类似产品：：MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞

Pt K1 (NBL-3)细胞类似产品：：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿HAO隔离衣，戴HAO口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。

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BCPAP细胞类似产品：：NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞

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JKT1细胞类似产品：：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞

MT-3 [Human leukocytes]细胞类似产品：：PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞

SCCVII/St细胞类似产品：：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞

SK-GT-4细胞类似产品：：6-10B细胞、H1963细胞、M2-10B4细胞

KYSE30细胞类似产品：：MCF7/WT细胞、GA-10 clone 4细胞、JB6 Cl 30-7b细胞

NCL-H548细胞类似产品：：MOLM13细胞、MDA-MB-435S细胞、GH 3细胞

C166细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、N1E-115细胞、Malme3M细胞

H1792细胞类似产品：：HREC细胞、NP69细胞、16-HBE细胞

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