U-2932 Cells(赠送Str鉴定报告)|人弥漫大B淋巴瘤细胞

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细胞背景资料：弥漫大B淋巴瘤；女性

细胞形态：淋巴母细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：悬浮

NIH 3T6细胞类似产品：：CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞

IOSE-80细胞类似产品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、LO2细胞、H1781细胞

IHH细胞类似产品：：HS5细胞、Jurkat-E6细胞、LPC-H12细胞

OEC33细胞类似产品：：ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞

alphaTC1 Clone 6细胞类似产品：：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H-1930细胞类似产品：：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞

Pan02细胞类似产品：：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞

Tn5B1-4细胞类似产品：：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞

C3A细胞类似产品：：TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞

JROECL21细胞类似产品：：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮

HCC-1395细胞类似产品：：SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞

MFD-1细胞类似产品：：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞

Hep 3B2细胞类似产品：：JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞

MCM细胞类似产品：：P-36细胞、C3H 10T1/2细胞、MFE280细胞

P3 88 D1细胞类似产品：：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞

DHL-5细胞类似产品：：KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

AMO-1细胞类似产品：：Th17细胞、SSP-25细胞、VP303细胞

3T3-J2细胞类似产品：：Potorous tridactylus Kidney 1细胞、C-127细胞、VK2细胞

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KP-2细胞类似产品：：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞

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CNE2细胞类似产品：：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞

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OUMS-27细胞类似产品：：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞

SW-1417细胞类似产品：：Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞

LNCaP C4-2B细胞类似产品：：EB1细胞、HCE细胞、MAD109细胞

COLO394细胞类似产品：：373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞

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OSC-19细胞类似产品：：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞

H766T细胞类似产品：：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞

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JVM2细胞类似产品：：YES-2细胞、MES-SA/Dx-5细胞、SKHEP1细胞

WPE-int细胞类似产品：：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞

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HPDLF细胞类似产品：：HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞

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PLA-801C细胞类似产品：：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞

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CCC-HPF-1细胞类似产品：：rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞

HPAFII细胞类似产品：：UM-UC-1细胞、SKG-3a细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞

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Panc2.03细胞类似产品：：AMJ2-C8细胞、U266BL细胞、C 6细胞

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NR 8383细胞类似产品：：RH-30细胞、SF 539细胞、PLC8024细胞

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RKN细胞类似产品：：Tu177细胞、OE33细胞、ECV304细胞

HEK;293细胞类似产品：：HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞

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C57 Mouse Tumor 93细胞类似产品：：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞

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SNU-869细胞类似产品：：P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞

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MFE296细胞类似产品：：SU-DHL1细胞、CCD-841CoTr细胞、HBL1细胞

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Duke University 145细胞类似产品：：M619细胞、D-283 Med细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞

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