RPMI-1788 Cells(赠送Str鉴定报告)|人外周血B淋巴细胞

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细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转化

细胞形态：淋巴母细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：悬浮

P3/NS1/1-Ag4.1细胞类似产品：：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞

LPC-H12细胞类似产品：：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞

F-36P细胞类似产品：：Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞

BC-028细胞类似产品：：FHC细胞、H446细胞、IAR20细胞

JKT-1细胞类似产品：：HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

U-138 MG细胞类似产品：：NCIH196细胞、A549/DDP细胞、VMRCRCZ细胞

GM05862细胞类似产品：：H-1404细胞、Hs695T细胞、OVCA-433细胞

NCI-SNU-668细胞类似产品：：B16-BL6细胞、PATU-S细胞、L2细胞

NBLAN5T细胞类似产品：：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞

TE11细胞类似产品：：Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮

HCC0366细胞类似产品：：MCF/Adr细胞、RN-c细胞、NTC200细胞

MCF7-GFP细胞类似产品：：P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞

HUVSMC细胞类似产品：：H1436细胞、H2081细胞、SKMEL-1细胞

GTL16细胞类似产品：：NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞

OCI-LY-7细胞类似产品：：HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞

Hs 739.T细胞类似产品：：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞

培养细胞真的不难，Zui关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Zui近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做HAO支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候ZuiHAO给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

HCA7细胞类似产品：：CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞

QGY-7703细胞类似产品：：FLC7细胞、PFSK1细胞、MDCK2细胞

Hi-five细胞类似产品：：HTh-74细胞、CAL851细胞、NCIH211细胞

D-283MED细胞类似产品：：293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞

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H727细胞类似产品：：OCM-1细胞、A2780/CP70细胞、NCI-H358细胞

Hs739T细胞类似产品：：OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞

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H-1341细胞类似产品：：A1847细胞、MDBK (NBL-1)细胞、D-341Med细胞

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Sf21细胞类似产品：：U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞

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HFB细胞类似产品：：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞

Caco-2/ATCC细胞类似产品：：NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞

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Hs 343.T细胞类似产品：：TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞

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mousepodocyte细胞类似产品：：HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞

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SUM-190PT细胞类似产品：：SK-N-F1细胞、Calu-1细胞、CWR22-R1细胞

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H-2170细胞类似产品：：WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞

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TE 32.T细胞类似产品：：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞

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P3-X63-Ag8-6-5-3细胞类似产品：：JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞

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NCI-H1793细胞类似产品：：Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞

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PK-15细胞类似产品：：PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞

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SUM 190细胞类似产品：：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞

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WI-38细胞类似产品：：RD细胞、LMTK-细胞、OCI-AML3细胞

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Normal Rat, August 3, 1983细胞类似产品：：HL-60 clone15细胞、Rat 1细胞、HOK细胞

hs 68细胞类似产品：：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞

C3H10T1/2CL8细胞类似产品：：SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞

MEF (CF-1)细胞类似产品：：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞

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Ly10细胞类似产品：：SK-LU-1细胞、NRK 52E细胞、HT 144细胞

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H1404细胞类似产品：：He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞

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Natural Killer-92细胞类似产品：：BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞

SNUC2B细胞类似产品：：PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞

HuH28细胞类似产品：：IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞

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Mouse Forestomach Carcinoma细胞类似产品：：MCA 205细胞、SLMT-1细胞、YT细胞

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L-cells细胞类似产品：：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞

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MLA-144细胞类似产品：：H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞

Y3-Ag123细胞类似产品：：C4-1细胞、SK RC 20细胞、Hep-G2/C3A细胞

NUGC-2细胞类似产品：：LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞

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PE CA PJ34细胞类似产品：：H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞

Vx2细胞类似产品：：697细胞、NCIH2196细胞、Psi-2 DAP细胞

MBT-2细胞类似产品：：HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞

NCIH2009细胞类似产品：：FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞

H-1573细胞类似产品：：HUCEC细胞、RCSMC细胞、SkChA-1细胞

BEND细胞类似产品：：SJ-Rh 30细胞、HBMEC细胞、MOLP-2细胞

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KU812-F细胞类似产品：：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞

NIH-3T3细胞类似产品：：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞

G-292 clone A141B1细胞类似产品：：EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞

IBMF-7细胞类似产品：：HSC/mHSC细胞、SW954细胞、L5178-R细胞

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