YT Cells(赠送Str鉴定报告)|人NK细胞白血病细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：淋巴母细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：悬浮

Hs611T细胞类似产品：：B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞

SW-1463细胞类似产品：：HO1-N-1细胞、MCF.7细胞、BEAS2B细胞

Rat-2细胞类似产品：：KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞

NCIH1755细胞类似产品：：FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞

SK-MES1细胞类似产品：：G519细胞、MCF7-CTRL细胞、MB468细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NCI-SNU-886细胞类似产品：：SJSA-1细胞、MGC-803细胞、R 2 C细胞

VP229细胞类似产品：：SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞

GM02131A细胞类似产品：：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞

H847细胞类似产品：：FRO细胞、Huh 7.5.1细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞

SK.OV.3细胞类似产品：：HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

SK.MEL.28细胞类似产品：：H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞

HGC-27细胞类似产品：：FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞

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MXI细胞类似产品：：Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞

HEP-3B2细胞类似产品：：CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞

CWR22R细胞类似产品：：EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

BIU87细胞类似产品：：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞

P3/X63/Ag8.653细胞类似产品：：TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞

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SK LU 1细胞类似产品：：EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞

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TGBC11T细胞类似产品：：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞

SUM102细胞类似产品：：CPAE细胞、GS9L细胞、H2.35细胞

U251MG细胞类似产品：：3AO细胞、Cattle chondrocytes细胞、MCF10A细胞

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Ra #1细胞类似产品：：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞

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SO-RB50细胞类似产品：：U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞

NS-1-Ag4-1细胞类似产品：：H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞

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A549细胞类似产品：：D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞

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GA10细胞类似产品：：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞

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YT Cells(赠送Str鉴定报告)|人NK细胞白血病细胞

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Japanese Tissue Culture-28细胞类似产品：：HuH-28细胞、Pa18C细胞、Molm14细胞

KYSE410细胞类似产品：：PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞

ROS 17/2.8细胞类似产品：：HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞

Y3.AG.1.2.3细胞类似产品：：Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞

A2008细胞类似产品：：OsACL细胞、AU-Mel细胞、H-35 Reuber细胞

Be Wo细胞类似产品：：MDAMB330细胞、LNCaP C4-2B细胞、IMR-32细胞

2008细胞类似产品：：T241细胞、1301细胞、SK-Col-1细胞

HONE1细胞类似产品：：T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞

SK-GT-2细胞类似产品：：D-407细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Adeno-293细胞

Scott and White No. 13细胞类似产品：：NCI-H735细胞、HRC-99细胞、T-HEECs细胞

SNB19细胞类似产品：：TOV21细胞、NRK细胞、HCC1143细胞

H-2291细胞类似产品：：NCIH2029细胞、CHL-11细胞、NCI-H187细胞

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