MHCC97-H:高转移人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

MDA-468细胞类似产品：：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞

L78细胞类似产品：：L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞

Sp 2817细胞类似产品：：RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞

MGc80-3细胞类似产品：：Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：来源于中山医院，用人肝癌细胞株MHCC９７-H接种裸鼠，进行３次肺转移筛选，取肺转移瘤建成皮下接种后高度自发性肺转移的肝癌细胞系

MHCC97-H:高转移人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

H-28细胞类似产品：：NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞

HMEC-1细胞类似产品：：LICCF细胞、5637细胞、APRE-19细胞

RCC10 RGB细胞类似产品：：HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞

细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

MHCC97-H:高转移人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁生长

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

PA I细胞类似产品：：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞

MC-38细胞类似产品：：OE-21细胞、SUDHL8细胞、HeLa S3细胞

Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞类似产品：：SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞

NCI-H596细胞类似产品：：MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞

RC13细胞类似产品：：JF305细胞、BE2-C细胞、HSC5细胞

Leukemia L1210细胞类似产品：：Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞

SupB15WT细胞类似产品：：H-1944细胞、IGROV 1细胞、ME 180细胞

Hs 695T细胞类似产品：：P3/NS1/1-Ag4-1细胞、L-6细胞、Hos TE-85细胞

CFPAC细胞类似产品：：NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞

RPMI #1846细胞类似产品：：KE37细胞、HSC4细胞、HS578T细胞

RC-4B/C细胞类似产品：：SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞

HCC-1395细胞类似产品：：SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞

Jurkat clone A3细胞类似产品：：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞

A-427细胞类似产品：：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞

MCA-38细胞类似产品：：MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞

PC14细胞类似产品：：LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞

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DU145细胞类似产品：：RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞

EFM-192A细胞类似产品：：H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞

YD15细胞类似产品：：Hs940T细胞、Emory University-2细胞、SKNO-1细胞

SK-N-BE(2)细胞类似产品：：H2023细胞、NEC8细胞、CALU 1细胞

2PK3细胞类似产品：：NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞

Jurkat E6细胞类似产品：：JHH-2细胞、P3J-HR-1细胞、MOLM13细胞

Pt K1细胞类似产品：：Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞

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MS751细胞类似产品：：INS1细胞、EJ 138细胞、HEK-293 c18细胞

H2452细胞类似产品：：BrCL12细胞、PTK2细胞、EB2细胞

Hs863T细胞类似产品：：NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞

YT细胞类似产品：：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞

H-1436细胞类似产品：：PNT1/A细胞、SUM-52-PE细胞、Hca-F细胞

LIXC002细胞类似产品：：OCI/AML4细胞、Becker细胞、PC2细胞

SNUC1细胞类似产品：：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞

HN4细胞类似产品：：LA4细胞、MDA361细胞、H-1618细胞

KU 812F细胞类似产品：：RPMI-8226S细胞、MRC-9细胞、HCC1171细胞

LTEP-a2细胞类似产品：：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞

IMR90细胞类似产品：：Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞

NCI-H2227细胞类似产品：：H-2286细胞、HC11细胞、FAT细胞

MS1细胞类似产品：：H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞

G-292细胞类似产品：：U-CH1细胞、NCTC clone 1469细胞、H-647细胞

Uhth-74细胞类似产品：：HOS (TE85, Clone F5)细胞、P30-OHK细胞、OSKM-1细胞

Sp2/0-Ag-14细胞类似产品：：H1404细胞、SW 1463细胞、MCAEC细胞

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6-T CEM细胞类似产品：：1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞类似产品：：A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞

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HOP 92细胞类似产品：：WiDr/S细胞、624mel细胞、DI-TNC1细胞

16HBEo-细胞类似产品：：NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞

159 PT细胞类似产品：：T2细胞、H526细胞、HCC1937细胞

MFM-223细胞类似产品：：SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞

LS411N细胞类似产品：：H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞

Reuber-H-35 hepatoma细胞类似产品：：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞

KG1A细胞类似产品：：Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞

CL34细胞类似产品：：HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞

NIH:OVCAR-3细胞类似产品：：Super Tube细胞、HDLM-2细胞、IMR32细胞

bEnd.3[BEND3]细胞类似产品：：H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞

MGH-U1细胞类似产品：：OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞

SVHUC细胞类似产品：：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞

LAN-1细胞类似产品：：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞

BXPC3细胞类似产品：：ARPE-19细胞、GT38细胞、SL-29细胞

HuO9细胞类似产品：：SW1990细胞、Nb-2细胞、MCF 7B细胞

KNS-81细胞类似产品：：H-1876细胞、B16-F10细胞、H1734细胞

H-1395细胞类似产品：：A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞

Panc05.04细胞类似产品：：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞

LNCaP细胞类似产品：：Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞

MKN-7细胞类似产品：：KM12 SM细胞、108CC15细胞、NR-8383细胞

HT-22细胞类似产品：：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞

H35细胞类似产品：：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞

KP-N-RT细胞类似产品：：NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞

PAI细胞类似产品：：UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞

Hs281T细胞类似产品：：HBdSMC细胞、T9细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞

BpRc1细胞类似产品：：hTERT-HME1细胞、H1048细胞、IM-9细胞

OE33细胞类似产品：：HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞

FUOV1细胞类似产品：：COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞

LN 229细胞类似产品：：RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞

KG1A细胞类似产品：：Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞

HEK293-EBNA细胞类似产品：：Panc 2.03细胞、Hs746T细胞、U-937细胞

CLONE M3细胞类似产品：：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞

J 111细胞类似产品：：NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞

H-1623细胞类似产品：：HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞

Balb/c3T3细胞类似产品：：IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞

Reuber-H-35 hepatoma细胞类似产品：：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞

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MGC-803细胞类似产品：：NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞

HUT 226细胞类似产品：：HCC-2185细胞、HCoEpiC细胞、CMT 167细胞

SW 756细胞类似产品：：G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞

HC11 Mammary Epithelium细胞类似产品：：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞

L-cells细胞类似产品：：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞

G401细胞类似产品：：PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞

EO771细胞类似产品：：NCIH841细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞、Hs 852.T细胞

293-FT细胞类似产品：：P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞

Hs445细胞类似产品：：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞

NCI-H1836细胞类似产品：：GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞

SW-1783细胞类似产品：：FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞

207细胞类似产品：：CHOS细胞、Panc-03.27细胞、HEC1-A细胞

EC-GI细胞类似产品：：MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞

T-84细胞类似产品：：SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞

Hs688(A)T细胞类似产品：：WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞

NP69细胞类似产品：：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞

HEK;293细胞类似产品：：HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞

F442A细胞类似产品：：TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞

HGSMC细胞类似产品：：TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞

HSKMC细胞类似产品：：C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞

HSKMC细胞类似产品：：C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞

H-1184细胞类似产品：：MES23.5细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、MH-22a细胞

WEHI 164细胞类似产品：：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞

MHCC97-H:高转移人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Hs 739.T细胞类似产品：：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞

HFLS细胞类似产品：：MPC11细胞、HCC-9204细胞、HEM细胞

HGC27细胞类似产品：：SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞

SKNEP-1细胞类似产品：：HuLEC-5a细胞、KM-12细胞、786-O细胞

MDA-MB-231细胞类似产品：：KYSE70细胞、MLA-144细胞、CTX TNA2细胞

KYSE180细胞类似产品：：RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞

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