MDA-kb2:人正常乳腺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

NCI H2106细胞类似产品：：IPLB-SF-21细胞、Human podocyte细胞、TE671/RD细胞

LC-2-Ad细胞类似产品：：SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞

HS-940-T细胞类似产品：：Hs940-T细胞、WILL-2细胞、HSF2细胞

PLC8024细胞类似产品：：LS-174T细胞、KYSE30细胞、Panc3_27细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

MDA-kb2:人正常乳腺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

SuDHL 1细胞类似产品：：HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞

GB-1细胞类似产品：：DLD-1细胞、RPVSMC细胞、MOLT3细胞

Hx-147细胞类似产品：：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞

细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

SW 900细胞类似产品：：H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞

HREC细胞类似产品：：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞

MDA-MB231细胞类似产品：：SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞

CHP 100细胞类似产品：：PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞

IEC6细胞类似产品：：HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞

Huh-7细胞类似产品：：MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞

2V6.11细胞类似产品：：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞

JROECL21细胞类似产品：：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞

GalK 1细胞类似产品：：Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞

U-343细胞类似产品：：P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞

LM TK negative细胞类似产品：：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞

WSU-HN13细胞类似产品：：RPMI 8402细胞、H2073细胞、DAN-G细胞

HR1K细胞类似产品：：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞

K-562细胞类似产品：：GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞

DB细胞类似产品：：RGB细胞、NBL-3细胞、HEL299细胞

HBVSMC细胞类似产品：：CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞

HBVSMC细胞类似产品：：CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞

YES2细胞类似产品：：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞

Hs940-T细胞类似产品：：NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞

Capan 1细胞类似产品：：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞

HS-766T细胞类似产品：：SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞

SUDHL-8细胞类似产品：：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞

HIT-T15细胞类似产品：：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞

TE671细胞类似产品：：AU-Mel细胞、SK.MEL.28细胞、Y3.AG.1.2.3细胞

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HDQ-P1细胞类似产品：：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞

A 72细胞类似产品：：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞

Swiss 3T6细胞类似产品：：GM02219D细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞、KM-12细胞

Hs746-T细胞类似产品：：DU 4475细胞、NCI-H2126细胞、KY-270细胞

Tsup-1细胞类似产品：：CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞

ME1细胞类似产品：：TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞

SR-786细胞类似产品：：OCI/AML-4细胞、EFM-192B细胞、SK-RC-52细胞

OsA-CL细胞类似产品：：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞

HCC1569细胞类似产品：：MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞

IR 983F细胞类似产品：：MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞

Embryonic Bovine Tracheal cells细胞类似产品：：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞

HGBEC细胞类似产品：：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞

H-1092细胞类似产品：：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞

MN9D细胞类似产品：：U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞

DU 145细胞类似产品：：Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞

Hs600T细胞类似产品：：SNK1细胞、Hs832T细胞、U20-S细胞

T98-G细胞类似产品：：H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞

MCA 38细胞类似产品：：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞

CF PAC-1细胞类似产品：：WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞

H1092细胞类似产品：：MM134细胞、C166细胞、MCF/Adr细胞

WB-F344细胞类似产品：：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞

B 95.8细胞类似产品：：NS20Y细胞、KBM5细胞、HFE-145细胞

F56 [Human neoplasm]细胞类似产品：：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞

NCI-H510A细胞类似产品：：G-292 clone A141B1细胞、H209细胞、CL1.0细胞

C3H10T1/2CL8细胞类似产品：：SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞

RCC10RGB细胞类似产品：：PLA801-95C细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞、MIO-M1细胞

AM细胞类似产品：：HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞

2T细胞类似产品：：HEK-293A细胞、rUCMSCs细胞、NCM460细胞

SUM 102PT细胞类似产品：：H660细胞、BC-009细胞、SK-LU-1细胞

HT-29/CX-1细胞类似产品：：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞

CAL-27细胞类似产品：：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞

GM07404D细胞类似产品：：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞

IHH-4细胞类似产品：：PE CA PJ34细胞、CEM-C1细胞、L 132细胞

SW 1990细胞类似产品：：MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞

SUDHL-6细胞类似产品：：MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞

NFS60细胞类似产品：：HUT-125细胞、NGEC细胞、RPMI 1846细胞

SNU-878细胞类似产品：：HR8348细胞、BMSC/hBMSCs细胞、ARPE19细胞

MDA-MB231细胞类似产品：：SF-126细胞、HMEL细胞、AN-3细胞

Hep3B细胞类似产品：：P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞

HeLa/DDP细胞类似产品：：COLO 320细胞、KATO 3细胞、L-6 myoblast细胞

Line 870 Emory University-4细胞类似产品：：CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞

HCC-78细胞类似产品：：H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞

BN-CL2细胞类似产品：：SW-1271细胞、OCI/AML-4细胞、Calu-3细胞

KYSE-30细胞类似产品：：95-D细胞、NCTC929细胞、3T3 L1细胞

SW-579细胞类似产品：：OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞

THP 1细胞类似产品：：HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞

WPMY-1细胞类似产品：：8226细胞、K7M2-WT细胞、VM Cub 1细胞

H3396细胞类似产品：：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞

QG-56细胞类似产品：：SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞

ChaGo K-1细胞类似产品：：UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞

EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞类似产品：：Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞

PLA-801C细胞类似产品：：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞

NCI-H-82细胞类似产品：：BMDC细胞、HOS-TE85细胞、M619细胞

OVCAR432细胞类似产品：：LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞

RMG1细胞类似产品：：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞

NCI-H1954细胞类似产品：：TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞

DMS-114细胞类似产品：：MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞

COLO684细胞类似产品：：GP5d细胞、MDA134细胞、SNUC1细胞

ARPE19细胞类似产品：：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞

BrCL18细胞类似产品：：MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞

GB-1细胞类似产品：：DLD-1细胞、RPVSMC细胞、MOLT3细胞

MKN 7细胞类似产品：：MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞

H-1993细胞类似产品：：Panc02细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、293A细胞

NCI-H-82细胞类似产品：：BMDC细胞、HOS-TE85细胞、M619细胞

MIA-Pa-Ca-2细胞类似产品：：451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞

Hs940T细胞类似产品：：A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞

CHO/dhFr-细胞类似产品：：MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞

293T/17细胞类似产品：：SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞

MN 60细胞类似产品：：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞

Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞类似产品：：T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞

TW-039细胞类似产品：：RT-4细胞、102PT细胞、GalK 1细胞

NIH:OVCAR-3细胞类似产品：：Super Tube细胞、HDLM-2细胞、IMR32细胞

Hs839.T细胞类似产品：：SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞

SW 527细胞类似产品：：UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞

SVHUC细胞类似产品：：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞

LMH细胞类似产品：：SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞

H-87细胞类似产品：：Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞

MH-22a细胞类似产品：：High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞

NSI/1-Ag4-1细胞类似产品：：NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞

SKMEL-2细胞类似产品：：M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞

H2347细胞类似产品：：ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞

BCPAP细胞类似产品：：NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞

MDA-kb2:人正常乳腺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

16-HBE14o细胞类似产品：：SN12-PM6细胞、HEC1-B细胞、P-388D1细胞

K562/ADP细胞类似产品：：SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞

NCIH596细胞类似产品：：Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞

4-1st细胞类似产品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞

AML12细胞类似产品：：MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞

Roswell Park Memorial Institute 2650细胞类似产品：：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞

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