C-33 A:人子宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

PLC-8024细胞类似产品：：aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞

RPMI8226/S细胞类似产品：：HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞

PANC 1005细胞类似产品：：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞

SKNDZ细胞类似产品：：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：C-３３A细胞株是N. Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株(参见ATCC CRL-１５９４和ATCC CRL-１５９５)中的一株。 细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态。 连续传代可以观察到核型不稳定。 存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。 P５３表达上调，且有一个２７３位密码子的点突变导致Arg -> Cys的替换。 人乳头瘤病毒DNA及RNA阴性。

C-33 A:人子宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

TB-1 Lu细胞类似产品：：Jurkat细胞、b.End3细胞、D341MD细胞

NCIH2347细胞类似产品：：SW-48细胞、MFE296细胞、KOPN8细胞

A-253细胞类似产品：：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞

常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到Zui小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果HAO，预防性应用比污染后使用HAO(但迄今尚无对抗支原体抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择Zui后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入GAO压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

C-33 A:人子宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁生长

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

PANC 327细胞类似产品：：HepG2/C3A细胞、PC-3M IE8细胞、2E8细胞

143B TK-细胞类似产品：：GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞

HFF1细胞类似产品：：BNL 1ME A.7R.1细胞、MB39细胞、H295R-S1细胞

SW900细胞类似产品：：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞

DLD 1细胞类似产品：：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞

STC-1细胞类似产品：：Tu-686细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞、NIH/3T3细胞

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JCA-1细胞类似产品：：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞

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NCI-H747细胞类似产品：：C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞

NCI-H1703细胞类似产品：：LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞

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C-33 A:人子宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

BCAP37细胞类似产品：：HSCT6细胞、HSC-3细胞、GM00637细胞

H-2171细胞类似产品：：H-2030细胞、MO59J细胞、HIT T-15细胞

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Kuramochi细胞类似产品：：OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞

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SK-N-BE细胞类似产品：：ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞

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