P19:小鼠睾丸畸胎瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"P19:小鼠睾丸畸胎瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

Mouse podocyte细胞类似产品：：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞

QGP1细胞类似产品：：NCI-H220细胞、MT-2J细胞、LS-180细胞

HPAF细胞类似产品：：Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞

SK-LU-1细胞类似产品：：OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：P１９细胞株是从C３H/He小鼠中诱导的恶性畸胎瘤中建立的。该细胞在含有０.１mM的培养基中可高效率地克隆。该细胞具有多能性，在５００nM维A酸诱导下可以分化成神经和神经胶质样细胞；在０.５%~１.０%二甲亚砜(DMSO)存在下，分化形成心脏和骨骼肌样细胞，但不形成神经或神经胶质样细胞；在DMSO和维A酸同时存在时，细胞的分化与只有维A酸一样。

P19:小鼠睾丸畸胎瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

Michigan Cancer Foundation-7细胞类似产品：：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞

JROECL21细胞类似产品：：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞

OUMS23细胞类似产品：：LA795细胞、WEHI-164细胞、Panc 03.27细胞

细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，Zui后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒：包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较GAO，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。

GM04678细胞类似产品：：P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞

MRASMC细胞类似产品：：Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞

MKN45细胞类似产品：：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞

L2细胞类似产品：：D562细胞、TALL-104细胞、NPC-TW 039细胞

KLN-205细胞类似产品：：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞

NCI-H196细胞类似产品：：NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞

RN-c细胞类似产品：：BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞

CEMC7细胞类似产品：：HPDLF细胞、Jijoye细胞、H.Ep. #2细胞

BHK-21细胞类似产品：：QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞

MV4:11细胞类似产品：：P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞

MV4-11细胞类似产品：：EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞

VM-CUB-I细胞类似产品：：SHIN-3细胞、HFL 1细胞、HOS(TE85)细胞

APRE-19细胞类似产品：：HuTu-80细胞、RAW2647细胞、OCI-LY-1细胞

YES-2细胞类似产品：：NCI-H889细胞、OCI-LY-18细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞

SW-1271细胞类似产品：：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞

NCIH1792细胞类似产品：：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞

KU-812-F细胞类似产品：：SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞

U266 B1细胞类似产品：：NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞

SK-N-BE(2C)细胞类似产品：：MOLP8细胞、INS1E细胞、LM2-4175细胞

hSCC-25细胞类似产品：：SF 295细胞、K1735细胞、HDF-a细胞

TF-1细胞类似产品：：Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞

UPCI-SCC-090细胞类似产品：：U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞

H295R细胞类似产品：：Mia PACA 2细胞、MM134细胞、H660细胞

C12细胞类似产品：：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞

P19:小鼠睾丸畸胎瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

NB-4细胞类似产品：：NCI-HUT-125细胞、HCC-1438细胞、HT clone H9细胞

HLEB3细胞类似产品：：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞

MNNG/HOS Cl #5细胞类似产品：：Chinese Hamster Lung细胞、CHP-212细胞、Hs 895 T细胞

WM2664细胞类似产品：：A-172 MG细胞、P3J HR1-K细胞、KYSE 50细胞

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Reuber H35细胞类似产品：：TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞

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BRL 3A细胞类似产品：：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞

SF 767细胞类似产品：：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞

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HaCaT细胞类似产品：：HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞

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NUGC-4细胞类似产品：：WSU-DLCL-2细胞、3T3 clone A31细胞、DC2.4细胞

MKN45细胞类似产品：：TE-671细胞、EnCa1细胞、A3细胞

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Det 562细胞类似产品：：Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞

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细胞、Hs 888Lu细胞

H2171细胞类似产品：：LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞

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MBT-2细胞类似产品：：HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞

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NB.4细胞类似产品：：FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞

CALU1细胞类似产品：：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞

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Tu177细胞类似产品：：CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞

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BJA-B-1细胞类似产品：：GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞

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H441细胞类似产品：：HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞

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KASUMI6细胞类似产品：：NCIH1435细胞、OCI/AML-3细胞、RMG1细胞

C-4-I细胞类似产品：：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞

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H748细胞类似产品：：MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞

C-28/I2细胞类似产品：：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞

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MM1.S细胞类似产品：：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞

CNE2细胞类似产品：：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞类似产品：：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞

NCI-H735细胞类似产品：：OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞

HONE-1细胞类似产品：：PG-4 S+L-细胞、GM05372E细胞、H1522细胞

HBL1细胞类似产品：：U2-OS细胞、VSMC细胞、D324细胞

MGC-803细胞类似产品：：NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞

NCIH1355细胞类似产品：：HMSC细胞、D341细胞、T. T细胞

CAL 33细胞类似产品：：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞

P19:小鼠睾丸畸胎瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

NCI.H522细胞类似产品：：PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞

M059J细胞类似产品：：Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞

WEHI-3细胞类似产品：：BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞

SK-MEL-24细胞类似产品：：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞

S180细胞类似产品：：SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞

NCI-H2286细胞类似产品：：SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞

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