H-EMC-SS:人软骨肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化HAO导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不HAO。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

MPC-83细胞类似产品：：PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞

TGW-nu细胞类似产品：：SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞

QGY 7701细胞类似产品：：NCI H23细胞、HOPC细胞、MS1细胞

KALS1细胞类似产品：：NCIH209细胞、2BS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：上皮细胞样

IHHA-1细胞类似产品：：G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞

NCIH747细胞类似产品：：SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞

HT 1080细胞类似产品：：KG1A细胞、SKNBE(2)细胞、RMG-1细胞

细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握HAO细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性HAO，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点，要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。

细胞传代方法：１：４-１：８传代；每周换液３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

COLO-680N细胞类似产品：：HEK-293FT细胞、KP 4细胞、HGSMC细胞

CTLL2细胞类似产品：：HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞

CORL105细胞类似产品：：HT-29细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、MDA-MB 361细胞

CAOV3细胞类似产品：：CEL细胞、ACHN细胞、B16-F1细胞

HCC-1569细胞类似产品：：WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞

RKO-E6细胞类似产品：：RetroPack PT67细胞、HMEL细胞、SF126细胞

HUT 28细胞类似产品：：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞

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NCIH596细胞类似产品：：Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞

DoHH2细胞类似产品：：VMRCRCZ细胞、KYSE 180细胞、H-2291细胞

NCI-H2122细胞类似产品：：R1610细胞、U-CH1细胞、HFL1细胞

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Me-Wo细胞类似产品：：CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞

Calu6细胞类似产品：：Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞

NRK clone 52E细胞类似产品：：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞

Hepa-RG细胞类似产品：：SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞

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HFLS-RA细胞类似产品：：Evsa-T细胞、J774 A.1细胞、RAW 264.7细胞

H-EMC-SS:人软骨肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

CHL-1细胞类似产品：：NCI-128细胞、HEK/EBNA细胞、MGH-U1细胞

SKCol1细胞类似产品：：AtT 20细胞、NCIH250细胞、OVCAR-8/ADR细胞

SK-RC-39细胞类似产品：：PE/CA-PJ34细胞、BT.549细胞、COR-L51细胞

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BGC823细胞类似产品：：KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞

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OVCAR3细胞类似产品：：BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞

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Jeko1细胞类似产品：：Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞

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