HCC1428:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

6T-CEM细胞类似产品：：SNU-449细胞、MALME 3M细胞、Cattle chondrocytes细胞

SNU-719细胞类似产品：：HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞

Hs600T细胞类似产品：：SNK1细胞、Hs832T细胞、U20-S细胞

ETCC-007细胞类似产品：：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

HCC1428:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

293-FT细胞类似产品：：P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞

Rat Skin 1细胞类似产品：：UCLA SO M21细胞、B16BL-6细胞、CAL39细胞

FDC-P1细胞类似产品：：CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞

购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。

细胞传代方法：１：４-１：８传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

HCC1428:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁生长，偶尔上皮细胞液泡的形成

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

C-4 I细胞类似产品：：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞

NCI-H1975细胞类似产品：：LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞

RINm-5F细胞类似产品：：Capan-2细胞、NCIH1781细胞、hs 68细胞

H9细胞类似产品：：8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞

HEK293-EBNA细胞类似产品：：Panc 2.03细胞、Hs746T细胞、U-937细胞

SACCLM细胞类似产品：：HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞

HEK-293A细胞类似产品：：ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞

NCIH28细胞类似产品：：SJRH 30细胞、Tu 177细胞、3 LL细胞

Cloudman M3细胞类似产品：：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞

H1755细胞类似产品：：Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞

HuH-6细胞类似产品：：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞

U-2OS细胞类似产品：：RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞

HIBEpiC细胞类似产品：：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞

H-748细胞类似产品：：Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞

Madin-Darby Bovine Kidney细胞类似产品：：C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞

NTera-2D1细胞类似产品：：HuH7细胞、NALM-6-M1细胞、TKB1细胞

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IHC-ST1细胞类似产品：：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞

QGP 1细胞类似产品：：H-35细胞、LTEPsm细胞、CATH.a细胞

HSAS4细胞类似产品：：A 2058细胞、C8166细胞、MDA-MB-134VI细胞

LL/2 (LLC1)细胞类似产品：：HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞

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TE-12细胞类似产品：：SKNBE细胞、U2-OS细胞、SuDHL 1细胞

HOS-TE85细胞类似产品：：SkMel31细胞、MS1细胞、OCI/AML-4细胞

K562细胞类似产品：：SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞

MUGCHOR1细胞类似产品：：no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞

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Colon26细胞类似产品：：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞

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Astrocyte type I clone细胞类似产品：：NCI-SNU-1细胞、H2.35细胞、SHI1细胞

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IOSE 29细胞类似产品：：293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞

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L-M (TK-)细胞类似产品：：Sp2/0细胞、SKGT2细胞、SKG IIIa细胞

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MeT5A细胞类似产品：：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞

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NFS 60细胞类似产品：：CHO细胞、NCI-SNU-761细胞、Malme3M细胞

HFL1细胞类似产品：：MC3T3细胞、COLO-684细胞、SKO-007细胞

WC00044细胞类似产品：：HEK 293 EBNA细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、MDA-175细胞

HCC1428:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

B16/F10细胞类似产品：：Panc_05_04细胞、CAL 39细胞、HCC366细胞

HR1K细胞类似产品：：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞

TK.10细胞类似产品：：HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞

SW-1353细胞类似产品：：AZ521细胞、NCIH146细胞、C42细胞

HCT116细胞类似产品：：Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞

Granta519细胞类似产品：：TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞

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