HCC70:人乳腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"HCC70:人乳腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

P3-NS1/1-Ag4-1细胞类似产品：：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞

NIH:OVCAR-10细胞类似产品：：RPTEC TERT1细胞、HONE-1细胞、MDA MB 175 VII细胞

Panc8.13细胞类似产品：：GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞

SW954细胞类似产品：：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

HCC70:人乳腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

UACC-812细胞类似产品：：HT144-mel细胞、CL 1-5细胞、H69C细胞

THP 1细胞类似产品：：HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞

H9细胞类似产品：：8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

HCC70:人乳腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

HCCC-9810细胞类似产品：：ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞

NOR-10细胞类似产品：：ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞

SCL2细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、4175细胞、TFK-1细胞

HCC-1806细胞类似产品：：D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞

KBM-7/Hap8细胞类似产品：：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞

MTC-TT细胞类似产品：：UMC11细胞、MeWo细胞、HBVSMC细胞

T-84细胞类似产品：：SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞

DI TNC1细胞类似产品：：H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞

H841细胞类似产品：：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞

Lieming Xu-2细胞类似产品：：HSC细胞、H810细胞、U251n细胞

hFOB1.19细胞类似产品：：Helacyton gartleri细胞、IPLB-SF 21细胞、Ramos细胞

EB-2细胞类似产品：：Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞

C918细胞类似产品：：BNL CL.2细胞、HCT-15细胞、MDA435细胞

NTera2 cl.D1细胞类似产品：：PaTu8988s细胞、253J B-V细胞、CoC1细胞

DMS-273细胞类似产品：：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞

COLO 320F细胞类似产品：：G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞

COLO 320F细胞类似产品：：G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞

KY-50细胞类似产品：：CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞

BC-3H-1细胞类似产品：：H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞

KOSC2细胞类似产品：：TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞

HuT-102细胞类似产品：：102PT细胞、SK-UT-1细胞、P3-X63Ag8细胞

RPE1细胞类似产品：：WM 266-4细胞、H-2195细胞、CCD-112 CoN细胞

M619细胞类似产品：：H498细胞、PC-10细胞、UM-RC-2细胞

COR-L23细胞类似产品：：CF Pac1细胞、J774A1细胞、NFS 60细胞

HCC70:人乳腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Hs 445细胞类似产品：：OP9细胞、TK.10细胞、H-1963细胞

OCI-Ly01细胞类似产品：：Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞

LM-TK-细胞类似产品：：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞

Bx-PC3细胞类似产品：：Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞

SNB.19细胞类似产品：：LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞

Renal Carcinoma细胞类似产品：：LNCaP subline C4-2细胞、H9c2细胞、Hs 888.T细胞

H-28细胞类似产品：：NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞

BL2141细胞类似产品：：CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞

SKO007细胞类似产品：：L1210细胞、BL-6细胞、HNE-3细胞

NCI-SNU-387细胞类似产品：：Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞

Tb 1-Lu细胞类似产品：：BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞

SK-NSH细胞类似产品：：COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞

OV90细胞类似产品：：McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞

HIT T15细胞类似产品：：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞

PG-4(S+L-)细胞类似产品：：F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞

SDBMSC细胞类似产品：：hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞

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NCIH1623细胞类似产品：：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞

293-FT细胞类似产品：：P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞

MDCC-MSB-1细胞类似产品：：C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞

Hs 870.T细胞类似产品：：RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞

MC 116细胞类似产品：：GM06141细胞、KFB细胞、MH-S细胞

CNE1-LUC细胞类似产品：：TE3A细胞、C643细胞、H-889细胞

NCI-H2073细胞类似产品：：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞

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H2291细胞类似产品：：RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞

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WERI Rb-1细胞类似产品：：LY细胞、SW1116细胞、U-343 MG细胞

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HEP3B2细胞类似产品：：Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞

Hs 870.T细胞类似产品：：RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞

2BS细胞类似产品：：alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞

INS-1E细胞类似产品：：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞

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BA/F3细胞类似产品：：DSL-6A-C1细胞、PANC-03-27细胞、MDA-361细胞

HEC1-A细胞类似产品：：C33A细胞、DV90细胞、BHP-10细胞

SCL2细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、SKG IIIa细胞、TEV-1细胞

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U251n细胞类似产品：：IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞

NCI-H1666细胞类似产品：：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞

WM115mel细胞类似产品：：Panc203细胞、HTori-3.1细胞、UCLA RO-81A-1细胞

NHLF细胞类似产品：：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞

Huh7.5细胞类似产品：：Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞

D283 Med细胞类似产品：：253JB-V细胞、L 428细胞、BC3H1细胞

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C8D1A细胞类似产品：：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞

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Roswell Park Memorial Institute 7666细胞类似产品：：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞

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BC3H-1细胞类似产品：：769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞

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HIEC6细胞类似产品：：JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞

NCIH209细胞类似产品：：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞

SNU-119细胞类似产品：：HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞

Centre Antoine Lacassagne-27细胞类似产品：：MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞

HSC细胞类似产品：：MDAMB435S细胞、AC29细胞、D407 RPE细胞

TERT-RPE1细胞类似产品：：HT-55细胞、GM00637I细胞、H4-II-E细胞

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