VA-ES-BJ:人上皮样肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

SW 403细胞类似产品：：NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞

DoTc2 4510细胞类似产品：：COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞

NCIH661细胞类似产品：：YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞

SK-MEL5细胞类似产品：：HemECs细胞、HUT-28细胞、SW 403细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

VA-ES-BJ:人上皮样肉瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

H-711细胞类似产品：：GM03570细胞、SNK1细胞、NIT-1细胞

MN9D细胞类似产品：：U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞

Tu-177细胞类似产品：：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞

细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升GAO到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。

细胞传代方法：１：３传代，每周２次

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。

MGH-U1细胞类似产品：：OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞

NCI-SNU-407细胞类似产品：：CAMA1细胞、UC-3细胞、H-2009细胞

HT 1376.T细胞类似产品：：U138细胞、hADSCs细胞、OVCA432细胞

M2-10B4细胞类似产品：：CMT 64细胞、IOSE-Van细胞、H522细胞

HCE细胞类似产品：：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞

CAL 12T细胞类似产品：：HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞

HEC-1-A细胞类似产品：：WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞

ECV-304细胞类似产品：：National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞

HEL-299细胞类似产品：：EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞

AML193细胞类似产品：：NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞

RCC-4细胞类似产品：：A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞

RPVSMC细胞类似产品：：SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞

F9细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞

HM细胞类似产品：：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞

A-2780细胞类似产品：：H9c2细胞、SCL-2细胞、BALL1细胞

WERI-Rb 1细胞类似产品：：C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞

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HEK/293细胞类似产品：：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞

RPMI-8402细胞类似产品：：SuperTube细胞、ABE­8.1/2细胞、HDMEC细胞

Murine Carcinoma-38细胞类似产品：：SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞

SUM-52细胞类似产品：：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞

L 363细胞类似产品：：WEHI 3B细胞、MDCK.2细胞、LU451细胞

Centre Antoine Lacassagne-78细胞类似产品：：H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞

EBC-1/original细胞类似产品：：Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞

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BV2细胞类似产品：：KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞

BALL1细胞类似产品：：Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞

C 6细胞类似产品：：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞

HELF细胞类似产品：：BAR-T细胞、MBT-2细胞、CAL-120细胞

Chang Cells细胞类似产品：：Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞

LOU-NH91细胞类似产品：：CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞

WEHI 164细胞类似产品：：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞

NB-19细胞类似产品：：HREC细胞、PGLH7细胞、F98细胞

HPF细胞类似产品：：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞

CCD966SK细胞类似产品：：KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞

SK MEL 5细胞类似产品：：OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞

BT-B细胞类似产品：：HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞

BrCL18细胞类似产品：：MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞

H1944细胞类似产品：：Giant Cell Tumor细胞、HFF1细胞、8505C细胞

DHL-16细胞类似产品：：MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞

HCC1954BL细胞类似产品：：HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞

WiDr/S细胞类似产品：：WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞

SW 1463细胞类似产品：：HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞

HBZY-1细胞类似产品：：OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞

Sf-21细胞类似产品：：KAT5细胞、MiaPaca.2细胞、PC10细胞

HT clone H9细胞类似产品：：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞

ELD-1细胞类似产品：：SKNEP-1细胞、22Rv-1细胞、BT-483细胞

S3-HeLa细胞类似产品：：Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞

OV1-P细胞类似产品：：H740细胞、SK-ChA-1细胞、UPCI:SCC154细胞

G-361细胞类似产品：：U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞

KMS-18细胞类似产品：：MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞

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HDQ-P1细胞类似产品：：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞

HCAEC细胞类似产品：：NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞

SUM 52细胞类似产品：：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞

R D细胞类似产品：：CAL 120细胞、MDA-MB-175VII细胞、SUM 149细胞

VMM39细胞类似产品：：A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞

P31/FUJ细胞类似产品：：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞

PC9细胞类似产品：：CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞

Panc 10.05细胞类似产品：：U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞

IMR 32细胞类似产品：：RenCa细胞、TE-85 clone 5细胞、BxPC-3细胞

PSN-1细胞类似产品：：BJ1细胞、TE15细胞、NCIH1792细胞

HT 1197细胞类似产品：：RFL 6细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、BEL-7402细胞

HEC1-B细胞类似产品：：HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞

ACC3细胞类似产品：：SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞

H1694细胞类似产品：：beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞

C3H-10T1/2细胞类似产品：：MUTZ-3细胞、ATN1细胞、Hs 281.T细胞

MDA-436细胞类似产品：：RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞

RBL-1细胞类似产品：：RBVEC细胞、Hs 604.T细胞、GM00215细胞

H-2029细胞类似产品：：NCTC-929细胞、UM-UC3细胞、SK MES 1细胞

NCI-HUT-125细胞类似产品：：Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞

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NS-20Y细胞类似产品：：CCRF CEM细胞、VK2细胞、U2932细胞

Soleus clone 8细胞类似产品：：Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞

COLO-741细胞类似产品：：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞

HK-2 [Human kidney]细胞类似产品：：University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞

C32r细胞类似产品：：NB19细胞、HEI193细胞、SF763细胞

A2780S细胞类似产品：：OE-33细胞、3T3 clone A31细胞、WSU-DLCL2细胞

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H4IIE细胞类似产品：：H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞

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HEY A8细胞类似产品：：ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞

H-1838细胞类似产品：：SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞

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COR-L279细胞类似产品：：NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞

BE(2)-M17细胞类似产品：：H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞

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P30-OHKUBO细胞类似产品：：BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞

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F9细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞

HPAF-2细胞类似产品：：L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞

A375S2细胞类似产品：：H1341细胞、PANC 1005细胞、PNT1-a细胞

NCIH1651细胞类似产品：：KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞

UM-UC-3细胞类似产品：：16HBEo-细胞、A704细胞、AN3CA细胞

PBMC细胞类似产品：：kms 11细胞、LLC-MK-2细胞、526-mel细胞

LN382细胞类似产品：：526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞

H-128细胞类似产品：：NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞

Panc203细胞类似产品：：SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞

MKN 28细胞类似产品：：AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞

MonoMac 6细胞类似产品：：MDA-MB-231-luc细胞、LA795细胞、AMC-HN-8细胞

H-1395细胞类似产品：：A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞

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Ramos (RA 1)细胞类似产品：：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞

OAC-P4C细胞类似产品：：Hut292细胞、Karpas 422细胞、AG06814-M细胞

BAEC细胞类似产品：：C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞

NCI-H747细胞类似产品：：C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞

Caco-2 BBe细胞类似产品：：RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞

LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞类似产品：：H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞

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