NCI-H1563:人胚肺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

SNU-368细胞类似产品：：AML12细胞、MS 751细胞、5-8F细胞

KU19-19细胞类似产品：：LTEPa2细胞、GalK1细胞、PLB-985细胞

GM16136细胞类似产品：：RGM1细胞、MUS-M1细胞、C3H10T1-2细胞

MSC细胞类似产品：：CALU1细胞、GT38细胞、ARPE-19细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H1563:人胚肺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

OUMS27细胞类似产品：：Tu-177细胞、SK-GT-2细胞、Panc_02_03细胞

KP2细胞类似产品：：Hs832.Tc细胞、PAa细胞、NRCC细胞

MJ细胞类似产品：：RN细胞、NCI-SNU-119细胞、Jurkat-FHCRC细胞

目前，跟公司签订长期战略合作伙伴的科研单位有山西中医学院、福建医科大学附属第二医院、上海市第六人民医院、北京大学医学部、同济大学、四平中心医院、广州中医药大学、中科院上海生命科学研究院生化与细胞研究所、解放军第３０６医院、江南大学、西南医院、吉首大学、西南大学化学化工学院、宁波大学、福建医科大学附属医院、苏州市同济医院、中南大学、延安大学附属医院、中国科学院上海药物研究所、天津市儿童医院、江苏省中医药研究院、湘雅医学院、第四军医大学预防系劳动与环境教研室、扬州大学、上海交通大学、中国医科大学、浙江省立同德医院、中国人民解放军第１５０中心医院、苏州大学、四川大学华西医院、云南大学、扬州大学兽医学院、上海交通大学医学院附属第九人民医院、海南医学院、江苏肿瘤医院、上海市闵行区中心医院、大连医科大学附属医院、中国科学院广州生物医药与健康研究院、沈阳药科大学、广州市第八人民医院、南京大学、浙江中医药大学、兰州大学、上海中医药大学、中国农业科学院饲料研究所、厦门市妇幼保健院、大学、南京军区总医院、天津市人民医院、北京医学科学肿瘤医院、上海市同济医院、江苏大学、桂林医学院附属医院、中国科学院化学研究所

细胞传代方法：１：３-１：４传代；每周换液２次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

NT2-D1细胞类似产品：：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞

MSTO-211H细胞类似产品：：H-748细胞、Bx-PC3细胞、ECGI10细胞

SNU-739细胞类似产品：：A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞

C-33 A细胞类似产品：：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞

BHP-10细胞类似产品：：SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞

NIH:OVCAR3细胞类似产品：：NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞

HCC0202细胞类似产品：：B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞

AQ-Mel细胞类似产品：：SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞

RL95细胞类似产品：：MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞

GM02132细胞类似产品：：SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞

EFO 27细胞类似产品：：TU 686细胞、Kit-225细胞、JB6 [Mouse]细胞

MKN-74细胞类似产品：：RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞

SGC7901细胞类似产品：：Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞

PE/CA-PJ34细胞类似产品：：HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞

OCI-LY-19细胞类似产品：：CCD-18Co细胞、A-427细胞、NCIH2452细胞

HSC-2细胞类似产品：：Hs-578-T细胞、EPC细胞、MPC-11细胞

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BALB/c 3T3 clone A31细胞类似产品：：SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞

C8D1A细胞类似产品：：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞

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HuH7细胞类似产品：：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞

P3/NS1/Ag4-1细胞类似产品：：2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞

HTori3细胞类似产品：：GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞

NCI-H1563:人胚肺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

MHCCLM3细胞类似产品：：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞

Huh 7.5细胞类似产品：：MiaPaCa2细胞、Lewis Lung Cancer细胞、SUM 190细胞

TKB-1细胞类似产品：：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞

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RPMI-7666细胞类似产品：：T HEECs细胞、NTERA-2/D1细胞、Hs281T细胞

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CHO K1细胞类似产品：：CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞

NCI-H1563:人胚肺复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

KYSE 520细胞类似产品：：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞

V79细胞类似产品：：MDCKII-WT细胞、SW-948细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞

U-266 AR1细胞类似产品：：DI TNC1细胞、SU86.86细胞、H1819细胞

RMC细胞类似产品：：NBL-2细胞、NCI-H1355细胞、Hs343T细胞

MN60细胞类似产品：：COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞

159 PT细胞类似产品：：T2细胞、H526细胞、HCC1937细胞

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