NCI-H1993:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

MAVER-1细胞类似产品：：AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞

MDA-MB-436细胞类似产品：：CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞

N1S1细胞类似产品：：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞

C4-2细胞类似产品：：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H1993:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

H341细胞类似产品：：MTEC1细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、MDAMB435细胞

HHUA细胞类似产品：：U266BL细胞、Hs-578Bst细胞、NK92-MI细胞

Ramos (RA)细胞类似产品：：BALB/3T3 clone A31细胞、H19-7细胞、Nb-2细胞

细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。

细胞传代方法：１：２—１：６传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

LA 4细胞类似产品：：T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞

CHO-ori细胞类似产品：：FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞

HIBEC细胞类似产品：：NCI-BL1339细胞、DOK细胞、NG-108-15细胞

OV1063细胞类似产品：：KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞

SBC5细胞类似产品：：NCI-SNU-C2A细胞、KLE细胞、RD细胞

MTEC1细胞类似产品：：HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞

3T3J2细胞类似产品：：UMRC2细胞、CAL-39细胞、HEK-293-FT细胞

SW 839细胞类似产品：：EL 4细胞、TT细胞、FU-97细胞

HS-695T细胞类似产品：：HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞

CHO细胞类似产品：：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞

MGH-U1细胞类似产品：：OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞

YH-13细胞类似产品：：HEp-2细胞、NT2细胞、SHEE细胞

INS-1E细胞类似产品：：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞

L Wnt-3A细胞类似产品：：HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞

MDA-436细胞类似产品：：RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞

LUDLU 1细胞类似产品：：HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞

MPC-5细胞类似产品：：NCI-SNU-886细胞、NCIH1703细胞、MOLM-14细胞

NIH:OVCAR-5细胞类似产品：：Ca9-22细胞、HCT-GEO细胞、Hs870T细胞

T241细胞类似产品：：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞

786-O RCC细胞类似产品：：SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞

RKOAS451细胞类似产品：：T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞

HuH-6细胞类似产品：：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞

HNSC细胞类似产品：：HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞

ARO-81细胞类似产品：：CT-26细胞、RCC4细胞、SK-N-BE(1)细胞

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HT29细胞类似产品：：SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞

KBM-7/Hap8细胞类似产品：：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞

EOC 20细胞类似产品：：SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞

MLE-12细胞类似产品：：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞

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SW 626细胞类似产品：：LC-1/sq细胞、HK-2 [Human kidney]细胞、159 PT细胞

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H510细胞类似产品：：OCI-LY-1细胞、BEL7404细胞、IMR-90细胞

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HEK293S细胞类似产品：：Michigan Cancer Foundation-12A细胞、SUM149PT细胞、LNCaP.FGC细胞

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Earle's L cells细胞类似产品：：MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞

SupT1细胞类似产品：：HB611细胞、HCC1171细胞、H4-IIE-C3细胞

RL95细胞类似产品：：MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞

DHL-6细胞类似产品：：MLMA细胞、H719细胞、A549/DDP细胞

HLEB-3细胞类似产品：：MM1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞、U266B1细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞类似产品：：LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞

ROS17/2.8细胞类似产品：：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞

HEL细胞类似产品：：OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞

PC3-M细胞类似产品：：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞

NCI-H1993:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

OCI/AML3细胞类似产品：：hRMECs细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、PC.3细胞

MNNG细胞类似产品：：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞

L132细胞类似产品：：SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞

Panc 10.05细胞类似产品：：U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞

NCI-H2009细胞类似产品：：CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞

C4-2 B细胞类似产品：：AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞

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