NCI-H1341:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"NCI-H1341:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

A375-S2细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、SU-DHL-16细胞、C8166细胞

HCT-GEO细胞类似产品：：SF 126细胞、H460细胞、NALM6细胞

SUM-102细胞类似产品：：H-1651细胞、NRK 49F细胞、SKN-AS细胞

EHEB细胞类似产品：：KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H1341:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

NCIH1693细胞类似产品：：C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞

M-G63细胞类似产品：：SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞

Hs839T细胞类似产品：：U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞

细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。

细胞传代方法：３-４天换液１次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

NCI-H1341:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：悬浮生长

细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较GAO，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。

CFSC-8B细胞类似产品：：L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞

769-P细胞类似产品：：143B细胞、MA 104细胞、RBE细胞

NCI-H322T细胞类似产品：：Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞

FRTL 5细胞类似产品：：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞

SCL I细胞类似产品：：UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞

H-2141细胞类似产品：：67NR细胞、TK10细胞、bEND.3细胞

PFSK-1细胞类似产品：：GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞

GC-2细胞类似产品：：OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞

U118MG细胞类似产品：：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞

DC2.4细胞类似产品：：Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞

MC3T3细胞类似产品：：P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞

OCI-LY-1细胞类似产品：：Hs 445细胞、L6细胞、SMMC7721细胞

OV90细胞类似产品：：McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞

SHG 44细胞类似产品：：HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞

alphaTC1 Clone 6细胞类似产品：：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞

McG-1细胞类似产品：：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞

NCIH2066细胞类似产品：：CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞

NCIH1755细胞类似产品：：FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞

VeroC1008细胞类似产品：：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞

A 2058细胞类似产品：：SK-N-BE2C细胞、G-292, clone A141B1细胞、LS 174 T细胞

MRASMC细胞类似产品：：Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞

174xCEM.T2细胞类似产品：：NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞

RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞类似产品：：HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞

Malme3M细胞类似产品：：NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞

NCI-H1341:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

SKMEL24细胞类似产品：：32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞

KYSE70细胞类似产品：：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞

Co320细胞类似产品：：HOMEC细胞、H-508细胞、SU-DHL1细胞

OCILY-19细胞类似产品：：HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞

JJN3细胞类似产品：：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞

NCIH2073细胞类似产品：：BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞

NPA细胞类似产品：：Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞

SUM190PT细胞类似产品：：PLA-801C细胞、MLE 12细胞、NOMO1细胞

MDA-468细胞类似产品：：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞

H-2330细胞类似产品：：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞

RKOAS451细胞类似产品：：T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞

PNT1-a细胞类似产品：：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞

TGW细胞类似产品：：Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞

MDAMB231细胞类似产品：：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞

NCI-H1385细胞类似产品：：TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞

Hs934T细胞类似产品：：Kit-225-K6细胞、hRPTC细胞、HEK293F细胞

SNU-5细胞类似产品：：SKLU01细胞、HCT_116细胞、KYSE-50细胞

OCI-LY-10细胞类似产品：：Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞

Hs819.T细胞类似产品：：SKO-007细胞、H-524细胞、NCIH2073细胞

KP-N-RT-BM细胞类似产品：：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞

SKRC20细胞类似产品：：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞

BHK21细胞类似产品：：MHCC97细胞、H2135细胞、SU 86.86细胞

MHCC97L细胞类似产品：：MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞

SN4741细胞类似产品：：Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞

32Dcl3细胞类似产品：：NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞

NCI H82细胞类似产品：：SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞

JROECL33细胞类似产品：：LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞

3T3-L1 ad细胞类似产品：：D-283 Med细胞、Hs 819.T细胞、H2009细胞

LS513细胞类似产品：：OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞

G361细胞类似产品：：EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞

CEF细胞类似产品：：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞

H-865细胞类似产品：：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞

KLM1细胞类似产品：：EU-4细胞、ESC-410细胞、NCIH2110细胞

HCC2218细胞类似产品：：Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞

UK Pan-1细胞类似产品：：HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞

SUM-102细胞类似产品：：H-1651细胞、IPAM-WT细胞、ACC-2细胞

OVCAR-10细胞类似产品：：IAR20细胞、H446细胞、A253细胞

NCI-H322T细胞类似产品：：Rh30细胞、3AO细胞、NCIH187细胞

OCI/AML-3细胞类似产品：：MDST8细胞、293FT细胞、He La细胞

PCI-4.2细胞类似产品：：CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞

H1819细胞类似产品：：HEL细胞、NCI-H446细胞、NCI-H1395细胞

SU-DHL1细胞类似产品：：Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞

SK.MEL.5细胞类似产品：：Co 115细胞、HCT.116细胞、PLA801C细胞

NCIH2052细胞类似产品：：G361mel细胞、A10细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞

MV3细胞类似产品：：TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞

TE-4细胞类似产品：：GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞

PE CA PJ34细胞类似产品：：H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞

CG4细胞类似产品：：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞

Capan 1细胞类似产品：：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞

HITT15细胞类似产品：：CNE-1细胞、Lu-65细胞、HR-1细胞

MV4;11细胞类似产品：：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞

Colon26细胞类似产品：：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞

SKNBE(2c)细胞类似产品：：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞

HHL5细胞类似产品：：NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞

KE 37细胞类似产品：：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞

MFE 296细胞类似产品：：SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞

NCI-SNU-387细胞类似产品：：Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞

NCIH1373细胞类似产品：：H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞

NCIH1373细胞类似产品：：H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞

P-19细胞类似产品：：HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞

CCRF-CEM C7细胞类似产品：：1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞

MFE 296细胞类似产品：：SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞

CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞

Madison lung细胞类似产品：：WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞

H2081细胞类似产品：：hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞

SUDHL1细胞类似产品：：GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞

H-1563细胞类似产品：：NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞

HME1细胞类似产品：：MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞

NCI-SNU-668细胞类似产品：：B16-BL6细胞、PATU-S细胞、L2细胞

COLO320HSR细胞类似产品：：H2110细胞、SuDHL 4细胞、H2073细胞

J774A.1细胞类似产品：：32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞

RH30SJ细胞类似产品：：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞

PLC/PRF/5细胞类似产品：：Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞

HC-11细胞类似产品：：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞

SK Mel 24细胞类似产品：：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞

NCTC-929细胞类似产品：：SW1417细胞、HGSMC细胞、HO8910PM细胞

SKMEL24细胞类似产品：：32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞

HCC941122细胞类似产品：：NCI-H1963细胞、Blotchy fibroblast-11细胞、H-1793细胞

C643细胞类似产品：：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞

Hs445细胞类似产品：：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞

LWnt3A细胞类似产品：：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞

LS1034细胞类似产品：：NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞

NCI-H1341:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

OCI-LY-7细胞类似产品：：HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞

Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞类似产品：：PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞

ECC-1细胞类似产品：：3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞

MC/9细胞类似产品：：A7r5细胞、H-1355细胞、CMEC/D3细胞

G401细胞类似产品：：PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞

CPA47细胞类似产品：：C3H10T1/2细胞、U251-MG细胞、AR4IP细胞

"