NCI-H211:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

MV522细胞类似产品：：PANC-28细胞、MCF-10A细胞、JROECL 33细胞

RPVSMC细胞类似产品：：SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞

LUDLU1细胞类似产品：：OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞

A10细胞类似产品：：SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H211:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

H-1105细胞类似产品：：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞

CT-26细胞类似产品：：Immortal Pig Intestinal-2I细胞、Hs-606-T细胞、A2780/Taxol细胞

H-1882细胞类似产品：：IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞

细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，Zui后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒：包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。

细胞传代方法：３-４天换液１次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

Potorous tridactylus Kidney 2细胞类似产品：：KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞

N1S1细胞类似产品：：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞

CMECs细胞类似产品：：H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞

MDAMB134VI细胞类似产品：：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞

MDA MB 175 VII细胞类似产品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞

KMH-2细胞类似产品：：OCI-Ly1细胞、SJRH-30细胞、aTC1 Clone 6细胞

NCIH2052细胞类似产品：：G361mel细胞、A10细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞

PFSK1细胞类似产品：：DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞

COLO.205细胞类似产品：：PC3细胞、RCM1细胞、NCI-1155细胞

SK Mel 1细胞类似产品：：OVCAR 5细胞、MUG-Chor1细胞、SW-579细胞

ChaGo K-1细胞类似产品：：UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞

C666-1细胞类似产品：：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞

C643细胞类似产品：：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞

L929(NCTC)细胞类似产品：：C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞

LLC-PK-1细胞类似产品：：KHYG细胞、INS-1细胞、HEK293EBNA细胞

C-6细胞类似产品：：MRC9细胞、JIMT细胞、GM-637细胞

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NCI-H2029细胞类似产品：：Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞

WILL-2细胞类似产品：：Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞

AE 1201细胞类似产品：：Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞

Tca-83细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-33细胞、NCI-H1648细胞、NCI-H1355细胞

RPMI 1788细胞类似产品：：Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞

PSN1细胞类似产品：：SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞

A431细胞类似产品：：HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞

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L-132细胞类似产品：：CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞

870细胞类似产品：：H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞

D-341细胞类似产品：：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞

Rat-1细胞类似产品：：GM00215A细胞、MDA231细胞、KU-812-F细胞

EA.hy 926细胞类似产品：：RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞

LAN-5细胞类似产品：：GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞

786-O细胞类似产品：：P-19细胞、Y3M细胞、KU812-F细胞

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KS-1 [Human glioblastoma]细胞类似产品：：BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞

Sf-21细胞类似产品：：KAT5细胞、MiaPaca.2细胞、PC10细胞

U343细胞类似产品：：HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞

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PCI:SG231细胞类似产品：：NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞

HUTU80细胞类似产品：：SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞

Line 870 Emory University-4细胞类似产品：：CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞

HCC 94细胞类似产品：：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞

BrCL12细胞类似产品：：LM2-4175细胞、HM06.A1细胞、EOL1细胞

CHP 212细胞类似产品：：HCC-1806细胞、H-1155细胞、KMS-11细胞

Panc10.05细胞类似产品：：MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞

Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞类似产品：：Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞

HeLa-S3细胞类似产品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、P3-X63-Ag8细胞、SW 579细胞

HBE135-E6E7细胞类似产品：：WERIRb1细胞、NFS 60细胞、GalK1细胞

Hs688(A)T细胞类似产品：：WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞

HeLa.S3细胞类似产品：：ND7/23细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、BT474细胞

C32 mel细胞类似产品：：MESSA-DX5细胞、C1R细胞、NGEC细胞

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SW-1783细胞类似产品：：FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞

Normal fibroblast-10细胞类似产品：：58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞

JC细胞类似产品：：NCI H157细胞、THEECs细胞、MDCKII-WT细胞

H295R-S1细胞类似产品：：AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞

HAC-84细胞类似产品：：Panc-3_27细胞、KNS62细胞、Hs-729-T细胞

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COLO-HSR细胞类似产品：：H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞

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OCI-AML-5细胞类似产品：：SNU398细胞、CAL51细胞、RAMSCs细胞

WM-266-4细胞类似产品：：CCD-966SK细胞、SW982细胞、H1666_DA细胞

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BHK细胞类似产品：：TEC细胞、I90细胞、H2085细胞

HBL1细胞类似产品：：U2-OS细胞、VSMC细胞、D324细胞

AE1201细胞类似产品：：COLO 357细胞、WM-266-mel细胞、MM1S细胞

SW 1783细胞类似产品：：BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞

WRL-68细胞类似产品：：LS411细胞、MeT-5A细胞、SUDHL-5细胞

MPC11细胞类似产品：：GalK 1细胞、H1238细胞、CF-PAC1细胞

CHP-212细胞类似产品：：RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞

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MDCK Type II细胞类似产品：：LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞

SK-HEP-1细胞类似产品：：SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞

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NTERA2-cloneD1细胞类似产品：：GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞

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UCW 100细胞类似产品：：RPTEC/TERT 1细胞、SW839细胞、TCam 2细胞

HCC1833细胞类似产品：：HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞

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MV-4:11细胞类似产品：：SUM-159-PT细胞、FHs74 Int细胞、H-1755细胞

A549 ATCC细胞类似产品：：ECC1细胞、NCI-H2023细胞、NCIH2122细胞

Caki-2细胞类似产品：：SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞

NCI-H211:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

TB-1 Lu细胞类似产品：：Jurkat细胞、b.End3细胞、D341MD细胞

NW-38细胞类似产品：：Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞

NCI-H128细胞类似产品：：UO.31细胞、YTMLC-90细胞、GM03573A细胞

C33细胞类似产品：：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞

Lu99A细胞类似产品：：B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞

HTori-3细胞类似产品：：LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞

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