NCI-H82:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

SUM 52细胞类似产品：：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞

BERH-2细胞类似产品：：MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞

UCLA NPA-87-1细胞类似产品：：SNU-16细胞、MHCC97-L细胞、HCC78细胞

NCI H345细胞类似产品：：TOV112D细胞、Earles's cells细胞、PATU-S细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：上皮细胞样

SKES1细胞类似产品：：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞类似产品：：H9c2 (2-1)细胞、R1800[RA]细胞、M059K细胞

COLO320/DM细胞类似产品：：Pro-Lec1.3C细胞、Jurkat-FHCRC细胞、GOTO细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：１：２—１：５传代，每周换液２-３次

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长

细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较GAO，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。

32D.3细胞类似产品：：TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞

Normal Rat Kidney-52E细胞类似产品：：U-138-MG细胞、MDA-MB157细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞

KYSE 50细胞类似产品：：HeLa S3细胞、HM1900细胞、Huh7.5.1细胞

Hepatoma 22细胞类似产品：：GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞

TE-6细胞类似产品：：SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞

P-36细胞类似产品：：HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞

P3-X63-Ag 8.653细胞类似产品：：NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞

IBMF-7细胞类似产品：：HSC/mHSC细胞、SW954细胞、L5178-R细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞类似产品：：LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞

Karpas422细胞类似产品：：CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞

NCIH1915细胞类似产品：：SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞

Granta519细胞类似产品：：TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞

UMR-106细胞类似产品：：NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞

H-1184细胞类似产品：：MES23.5细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、MH-22a细胞

A-204细胞类似产品：：COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞

OVCAR 4细胞类似产品：：TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞

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PLA 802细胞类似产品：：MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞

HOP92细胞类似产品：：MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞

GM05862细胞类似产品：：H-1404细胞、Hs695T细胞、OVCA-433细胞

SNUC1细胞类似产品：：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞

SU-DHL-16细胞类似产品：：RH8994细胞、NPC-TW 01细胞、H184A1细胞

HCT116细胞类似产品：：Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞

ASH-3细胞类似产品：：H-1703细胞、SW756细胞、NCI-H2342细胞

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HEC1B细胞类似产品：：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞

OCIAML2细胞类似产品：：DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞

SW900细胞类似产品：：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞

OCI-AML3细胞类似产品：：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞

ELD-1细胞类似产品：：SKNEP-1细胞、22Rv-1细胞、BT-483细胞

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NH-6细胞类似产品：：SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞

UWB1289细胞类似产品：：A 2780 CP细胞、Panc_05_04细胞、NCIH2081细胞

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KNS62细胞类似产品：：LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞

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B16F10细胞类似产品：：CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞

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TE 85 ClF-5细胞类似产品：：IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞

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ST486细胞类似产品：：GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞

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RBSMC细胞类似产品：：LNCaP-C4-2细胞、MDA MB231细胞、HFT 8810细胞

G402细胞类似产品：：MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞

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C8D1A细胞类似产品：：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞

MLA144细胞类似产品：：HCA7细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、Scott and White No. 13细胞

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T-ALL-1细胞类似产品：：NCI-H716细胞、NCIH2342细胞、ReNcell CX细胞

SK-RC 42细胞类似产品：：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞

IALM细胞类似产品：：DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞

NCTC-3960细胞类似产品：：JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞

HCC-1500细胞类似产品：：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞

Kasumi-6细胞类似产品：：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞

HPASMC细胞类似产品：：SW780细胞、Hs-600-T细胞、PAMC82细胞

CORL279细胞类似产品：：MILE SVEN1细胞、SR细胞、U87 MG细胞

ZR75_1细胞类似产品：：AML193细胞、CCC-ESF-1细胞、RPMI 2650细胞

NCI-H82:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Hs 852.T细胞类似产品：：IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞

EJ细胞类似产品：：Hepa-RG细胞、SNT8细胞、CORL105细胞

KG-1a细胞类似产品：：HVSMC细胞、ROS17/28细胞、QG-56细胞

B104 [Rat neuroblastoma]细胞类似产品：：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞

BALB/3T3 clone A31细胞类似产品：：CHO-ori细胞、RC-2细胞、LS-174细胞

T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞类似产品：：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞

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