SHP-77:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"SHP-77:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

OV2008细胞类似产品：：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞

RH7777细胞类似产品：：KALS-1细胞、HCC-827细胞、NCI-128细胞

Merwin Plasma Cell tumor-11细胞类似产品：：PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞

801-D细胞类似产品：：IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：上皮细胞样

NPA细胞类似产品：：Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞

DHL10细胞类似产品：：H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞

C41细胞类似产品：：HEK293-A细胞、C2A细胞、EMT6细胞

细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握HAO细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性HAO，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点，要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。

细胞传代方法：３-４天换液１次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长，少量贴壁

细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较GAO，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。

OVCAR10细胞类似产品：：U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞

LPC-H12细胞类似产品：：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞

TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品：：NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞

NCI-H2591细胞类似产品：：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞

Michigan Cancer Foundation-7细胞类似产品：：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞

IMR-90细胞类似产品：：LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞

6-10B细胞类似产品：：SK-ChA-1细胞、OVCA8细胞、SU-86-86细胞

SW 1116细胞类似产品：：WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞

OCI-Ly07细胞类似产品：：MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞

NFS-60细胞类似产品：：Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞

TE671/RD细胞类似产品：：WB-F344细胞、NCIH345细胞、SNU739细胞

ChaGo K-1细胞类似产品：：UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞

Panc 4.03细胞类似产品：：WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞

OCILY7细胞类似产品：：SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞

SGC-996细胞类似产品：：Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞

Hs888Lu细胞类似产品：：COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞

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HepG2细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞

Colo741细胞类似产品：：KYSE-410细胞、EnCa1细胞、TE671细胞

Human Melanoma Cell Bowes细胞类似产品：：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞

CCRFCEM细胞类似产品：：MM-1S细胞、SR786细胞、HTori:3细胞

SW-48细胞类似产品：：COLO 16细胞、H-2030细胞、B16 F1细胞

OCI-Ly7细胞类似产品：：NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞

LA-N-6(OAN)细胞类似产品：：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞

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GAK细胞类似产品：：RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞类似产品：：SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞

PC3细胞类似产品：：MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞

NCM356细胞类似产品：：MDCK II细胞、REC1细胞、AK细胞

Panc_05_04细胞类似产品：：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞

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P31FUJ细胞类似产品：：DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞

NSC-34细胞类似产品：：CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞

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C3H10T1/2 clone8细胞类似产品：：COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞

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UO-31细胞类似产品：：Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞

NK62a细胞类似产品：：OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞

HRIF细胞类似产品：：CV-1细胞、SUM149细胞、HPAF-II细胞

NCIH2030细胞类似产品：：DoHH-2细胞、Metastatic Variant 522细胞、SNU387细胞

TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品：：NCI-H2106细胞、MGECs细胞、PT-K75细胞

H-1092细胞类似产品：：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞

MCA-38细胞类似产品：：MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞

MAntle cell VERona-1细胞类似产品：：CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞

L-428细胞类似产品：：NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞

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AN3CA细胞类似产品：：MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞

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BIC细胞类似产品：：NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞

alphaTC1 Clone 6细胞类似产品：：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞

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TFK-1细胞类似产品：：PNT1A细胞、MES-SA-Dx5细胞、MDA PCa 2b细胞

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NCI-H1092细胞类似产品：：RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞

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FRTL-5细胞类似产品：：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞

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NIH-3T3细胞类似产品：：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞

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PC-9细胞类似产品：：CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞

AMC-HN8细胞类似产品：：Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞

SHP-77:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

NCI-H2591细胞类似产品：：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞

P3JHR1细胞类似产品：：CEMC7细胞、ECC-10细胞、JB6Cl30细胞

ROS17/2.8细胞类似产品：：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞

Hs742T细胞类似产品：：Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞

H-220细胞类似产品：：Cor L51细胞、SV-HUC-1细胞、PK 15细胞

BPH1细胞类似产品：：U118MG细胞、MDA-MB-435-S细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞

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