NCI-H841:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

Calu 6细胞类似产品：：LAN6细胞、H220细胞、K299细胞

Z138细胞类似产品：：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞

CCRF SB细胞类似产品：：H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞

FO [Mouse myeloma]细胞类似产品：：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：上皮细胞样

JeKo 1细胞类似产品：：HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞

NCI-747细胞类似产品：：Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞

HIEC细胞类似产品：：Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：１：３—１：５传代，

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：混合型生长

传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。

OCI-Ly 19细胞类似产品：：SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞

OCI-AML4细胞类似产品：：HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞

Pt K2细胞类似产品：：Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞

GM 637细胞类似产品：：TALL 1细胞、MV-1-Lu细胞、HCT15细胞

CMT 167细胞类似产品：：LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞

L-1210细胞类似产品：：Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞

3D4/21细胞类似产品：：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞

BEP2D细胞类似产品：：HuT102细胞、HFL-I细胞、LS-1034细胞

SMMC-7721细胞类似产品：：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞

CACO2细胞类似产品：：PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞

H-526细胞类似产品：：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞

WPE-int细胞类似产品：：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞

HCC-9204细胞类似产品：：MNNGHOS细胞、Sp2/0-Ag-14细胞、FTC-133细胞

MOLP-2细胞类似产品：：NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞

J 82细胞类似产品：：RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞

BIC细胞类似产品：：NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞

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SUM-52PE细胞类似产品：：GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞

Pa17C细胞类似产品：：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞

SKBr3细胞类似产品：：Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞

Cor L51细胞类似产品：：NU-GC-3细胞、8305C细胞、MeSoTheliOma-211H细胞

526细胞类似产品：：SK-RC-52细胞、LUDLU-1细胞、H548细胞

NCI-H295细胞类似产品：：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞

CAKI 2细胞类似产品：：RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞

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RPMI6666细胞类似产品：：CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞

OVCAR-3细胞类似产品：：TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞

C1R细胞类似产品：：HEK-293细胞、UMNSAH-DF1细胞、NOR 10细胞

190PT细胞类似产品：：Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞

MDAMB453细胞类似产品：：MDA-MB-436细胞、H-1651细胞、SK-ML2细胞

M210B4细胞类似产品：：BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞

WM 239-A细胞类似产品：：BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞

Ra No. 1细胞类似产品：：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞

COLO 699细胞类似产品：：TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞

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OCI/AML-2细胞类似产品：：HCC94细胞、SKNFI细胞、HC11细胞

RCC_7860细胞类似产品：：U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞

T/G HA VSMC细胞类似产品：：10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞

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NCTC 1469细胞类似产品：：WiDrTC细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞、HCC-1171细胞

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H1651细胞类似产品：：OVSAHO细胞、LC-2-Ad细胞、SkChA1细胞

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NCIH358细胞类似产品：：NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞

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RH-30细胞类似产品：：IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞

EC109细胞类似产品：：Ra No. 1细胞、Institute for Medical Research-90细胞、COLO678细胞

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MCF7/WT细胞类似产品：：MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞

Madin-Darby Canine Kidney细胞类似产品：：U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞

Kit225 K6细胞类似产品：：2780细胞、PA12细胞、NCI-H508细胞

NRK 52E细胞类似产品：：OVCAR8细胞、NCIH250细胞、NCI-HUT-460细胞

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HRPEpiC细胞类似产品：：HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞

SW-900细胞类似产品：：HD11细胞、Hs68细胞、AMO1细胞

MCF/Adr细胞类似产品：：BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞

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CAL51细胞类似产品：：MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞

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SW-1222细胞类似产品：：SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞

MZCRC1细胞类似产品：：PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞

AMJ2C8细胞类似产品：：Capan 2细胞、BE2C细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞

NCCIT细胞类似产品：：L-929细胞、Ca Ski细胞、NPC-TW01细胞

OV90细胞类似产品：：McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞

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8226细胞类似产品：：HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞

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Huh-7.5.1细胞类似产品：：L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞

TE10细胞类似产品：：V-79-4细胞、GM12878细胞、MPC5细胞

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Namalwa细胞类似产品：：A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞

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Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞类似产品：：SSP-25细胞、H6c7细胞、HANK细胞

RFL6细胞类似产品：：HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞

SDBMSC细胞类似产品：：hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞

NCI-H841:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

HCC2279细胞类似产品：：HuCC-T1细胞、NCIH446细胞、LIM-1215细胞

KRC/Y细胞类似产品：：VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞

NEC细胞类似产品：：U14细胞、H1355细胞、Clone M-3细胞

LS-513细胞类似产品：：NCIH1792细胞、OCIAML4细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞

A549ATCC细胞类似产品：：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞

EOC20细胞类似产品：：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞

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