KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

HuCC-T1细胞类似产品：：HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞

Pa16C细胞类似产品：：F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞

HCT-8/V细胞类似产品：：DR2R 1610细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、TCCSUP细胞

A2780CP70细胞类似产品：：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

As-PC1细胞类似产品：：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞

LPC-H12细胞类似产品：：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞

TE-85细胞类似产品：：Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞

细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，Zui后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒：包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

HCC1954-BL细胞类似产品：：HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞

Malme-3M细胞类似产品：：NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞

Hep G2/C3A细胞类似产品：：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞

H35细胞类似产品：：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞

TOV21细胞类似产品：：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞

SW-527细胞类似产品：：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞

MDA-MB-435-S细胞类似产品：：Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞

BCP-1细胞类似产品：：P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞

C-Lu-65细胞类似产品：：CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞

J82 COT细胞类似产品：：TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞

TSU-Pr1细胞类似产品：：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞

SKMEL-31细胞类似产品：：NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞

VK2/E6E7细胞类似产品：：ESC细胞、H660细胞、C17细胞

BNL.1ME A.7R.1细胞类似产品：：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞

T241细胞类似产品：：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞

NCI.H226细胞类似产品：：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞

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C-4-I细胞类似产品：：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞

MDAMB435细胞类似产品：：NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞

HS766T细胞类似产品：：CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞

Ketr3细胞类似产品：：HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞类似产品：：YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞

L6细胞类似产品：：SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞

T98G细胞类似产品：：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞

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NCIH889细胞类似产品：：LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞

N-87细胞类似产品：：108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞

FF-WT-BJ细胞类似产品：：hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞

NCTC 1469细胞类似产品：：WiDrTC细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞、HCC-1171细胞

LAPC4细胞类似产品：：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞

MBdSMC细胞类似产品：：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞

A549-Taxol细胞类似产品：：MLM细胞、KYSE410细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞

Normal Rat Kidney-52E细胞类似产品：：U-138-MG细胞、MDA-MB157细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞

CAL148细胞类似产品：：Hs895T细胞、QG-56细胞、SKOV-433细胞

NCI.H460细胞类似产品：：THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞

RCC_7860细胞类似产品：：U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞

HEK/293细胞类似产品：：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞

MARC145细胞类似产品：：FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞

Earle's L cells细胞类似产品：：MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞

L-5178-Y细胞类似产品：：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞

NCI-H28细胞类似产品：：Nittby-Salford 1细胞、L929(NCTC)细胞、H774细胞

RFL6细胞类似产品：：HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞

W133细胞类似产品：：HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞

NBL-1细胞类似产品：：LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞

3D4/21细胞类似产品：：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞

Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞类似产品：：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞

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Tu177细胞类似产品：：CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞

HTh 74细胞类似产品：：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞

SNK1细胞类似产品：：H1882细胞、NCI-H847细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞

HCC-1438细胞类似产品：：LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞

HPF细胞类似产品：：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞

H9c2(2-1)细胞类似产品：：MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞

CTLA4Ig-24细胞类似产品：：HEK293-H细胞、NCTC-929细胞、A2008细胞

LK 2细胞类似产品：：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞

IMCD3细胞类似产品：：P560细胞、MKN-1细胞、NCI-H2052细胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞类似产品：：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞

HLEC-B3细胞类似产品：：MOLT 16细胞、BN-CL2细胞、MTEC1细胞

Duke University 4475细胞类似产品：：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞

95-D细胞类似产品：：Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞

A-172细胞类似产品：：SK Mel 2细胞、Calu-3细胞、COLO-320-HSR细胞

RPMI-8226细胞类似产品：：Human Epithelioma-2细胞、P31/Fujioka细胞、X63.Ag8.653细胞

Hep 3B细胞类似产品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、NT2D1细胞、HDLM2细胞

HR-1细胞类似产品：：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞

SPC-A1细胞类似产品：：H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞

8305C_1细胞类似产品：：NCI-H2087细胞、P-815细胞、H345细胞

hMSC-BM细胞类似产品：：YT细胞、FAO-1细胞、NCIH1755细胞

A 253细胞类似产品：：P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞

LOU-NH-91细胞类似产品：：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞

NCI-H125细胞类似产品：：J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞

WC00079细胞类似产品：：A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞

HD11细胞类似产品：：GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞

H2108细胞类似产品：：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞

KTCTL-140细胞类似产品：：C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞

ACHN细胞类似产品：：HCV 29细胞、BrCL18细胞、MDA-MB-468细胞

578T细胞类似产品：：ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞

2T细胞类似产品：：HEK-293A细胞、rUCMSCs细胞、NCM460细胞

CATHa细胞类似产品：：KMB17细胞、GM 637细胞、GM 637细胞

SB细胞类似产品：：SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞

CEK细胞类似产品：：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞

MDAMB134VI细胞类似产品：：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞

HDQP1细胞类似产品：：Tissue Culture-1细胞、HuP-T4细胞、Ect1/E6E7细胞

P3X63细胞类似产品：：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞

P3X63细胞类似产品：：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞

NK-92MI细胞类似产品：：SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞

RPMI-8226S细胞类似产品：：RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞

SCC-25细胞类似产品：：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞

HASMC细胞类似产品：：HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞

TGW-I-nu细胞类似产品：：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞

Rat-1细胞类似产品：：GM00215A细胞、MDA231细胞、KU-812-F细胞

M-O7e细胞类似产品：：HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞

Earles's cells细胞类似产品：：BC3 H1细胞、OCI-LY-8细胞、NCI-SNU-C2B细胞

ketr 3细胞类似产品：：HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞

PC-9细胞类似产品：：CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞

AR-42J细胞类似产品：：SCC4细胞、RAEC细胞、RCC_7860细胞

HEP3B2细胞类似产品：：Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞

NCIH292细胞类似产品：：HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞

GOS-3细胞类似产品：：SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞

OCILY-19细胞类似产品：：HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞

NCI-SNU-761细胞类似产品：：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞

Fao细胞类似产品：：RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞

LNT-229细胞类似产品：：H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞

H2126细胞类似产品：：AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞

NKM1细胞类似产品：：ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞

NCI-SNU-C2B细胞类似产品：：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞

RPMI 6666细胞类似产品：：TOV-112细胞、Fetal Human Colon细胞、NCI-H1437细胞

HCC-1833细胞类似产品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞

KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

MUTZ-1细胞类似产品：：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞

OV-2008细胞类似产品：：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞

NCI-H1417细胞类似产品：：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞

NHLF细胞类似产品：：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞

HT 1197细胞类似产品：：RFL 6细胞、HEK293-FT细胞、IALM细胞

SuDHL 8细胞类似产品：：ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞

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