NCI-H660:人小细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

EA.hy 926细胞类似产品：：RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞类似产品：：Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞

SK-MES1细胞类似产品：：G519细胞、MCF7-CTRL细胞、MB468细胞

MZ-CRC-1细胞类似产品：：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：上皮细胞样

Hep G2-Luc细胞类似产品：：SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞

H2009细胞类似产品：：MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞

HEC1A细胞类似产品：：NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞

细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升GAO到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。

细胞传代方法：２-３天换液１次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

H1993细胞类似产品：：Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞

aTC1-6细胞类似产品：：WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞

HPAF2细胞类似产品：：EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞

HT115细胞类似产品：：OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞

L5178Y TK+/-3.7.2c细胞类似产品：：293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞

Hs839.T细胞类似产品：：SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞

EFM192B细胞类似产品：：COLO-394细胞、NCI-H2227细胞、Helacyton gartleri细胞

COLO-320-DM细胞类似产品：：GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞

H2135细胞类似产品：：HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞类似产品：：HFB细胞、PL-5细胞、MCF 7B细胞

PL11细胞类似产品：：BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞

brain-derived Endothelial cells.3细胞类似产品：：NH-6细胞、RPMI 7951细胞、OCI-Ly 3细胞

ABE­8.1/2细胞类似产品：：Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞

DU4475细胞类似产品：：LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞

A10细胞类似产品：：SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞

RenCa细胞类似产品：：NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞

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DU 145细胞类似产品：：Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞

HIT clone T15细胞类似产品：：NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞

NCI-H1155细胞类似产品：：H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞

Jurkat E6.1细胞类似产品：：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞

U373MG细胞类似产品：：TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞

U-CH1细胞类似产品：：CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞

CEM-CCRF (CAMR)细胞类似产品：：H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞

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IPI-2I细胞类似产品：：KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞

NP-69细胞类似产品：：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞

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IBMF-7细胞类似产品：：HSC/mHSC细胞、SW954细胞、L5178-R细胞

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Anip-973细胞类似产品：：D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞

HL 60细胞类似产品：：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞

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CG4细胞类似产品：：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞

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ARO81细胞类似产品：：SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞

BT-20细胞类似产品：：Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞

NCI-H660:人小细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

AQ-Mel细胞类似产品：：SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞

RAW264细胞类似产品：：TYK-nu细胞、CD18细胞、HIEC6细胞

RSMC细胞类似产品：：SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞

Mel-624细胞类似产品：：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞

MO59J细胞类似产品：：PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞

TE11细胞类似产品：：Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞

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