Hep-G2/C3A:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化HAO导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不HAO。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

ACCM细胞类似产品：：Rat Skin 1细胞、143B细胞、SW626细胞

CAL 51细胞类似产品：：Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞

HCC1143细胞类似产品：：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、NL-20细胞、MDCK-II细胞

IAR 20细胞类似产品：：NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hep-G2/C3A:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

MDA-MB436细胞类似产品：：LA-795细胞、X63Ag8.653细胞、Colon 38细胞

SNU739细胞类似产品：：CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞

MGSMC细胞类似产品：：WM 115细胞、Hs675细胞、16HBE14o-细胞

购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。

细胞传代方法：１：３—１：６传代，每周换液２次

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

Hep-G2/C3A:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

A 72细胞类似产品：：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞

WiDr/S细胞类似产品：：WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞

IOSE-29细胞类似产品：：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞

MPC11细胞类似产品：：GalK 1细胞、H1238细胞、CF-PAC1细胞

Hs-729-T细胞类似产品：：RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞

H9细胞类似产品：：8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞

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6-T CEM细胞类似产品：：1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞

H-35 Reuber细胞类似产品：：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞

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3T6 Swiss Albino细胞类似产品：：D283-MED细胞、NCI H23细胞、TI-73细胞

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