RCC10RGB:人肾细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"RCC10RGB:人肾细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

HCC-1428细胞类似产品：：BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞

NCI-H1105细胞类似产品：：NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞类似产品：：GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞

PG-4细胞类似产品：：SuDHL 5细胞、786-O细胞、Karpas299细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

RCC10RGB:人肾细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

RN细胞类似产品：：SCC-4细胞、4T1细胞、NCI-H1963细胞

Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞类似产品：：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞

H-196细胞类似产品：：HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞

细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理HAO工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，Zui大的YOU点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

RCC10RGB:人肾细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

OCI-Ly 18细胞类似产品：：8305C细胞、F81细胞、P-3J细胞

MALME.3M细胞类似产品：：P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞

SK.OV.3细胞类似产品：：HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞

HCC-70细胞类似产品：：Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞

MB157细胞类似产品：：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞

J45.01细胞类似产品：：H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞

C38细胞类似产品：：SUDHL1细胞、NCI-H441-4细胞、RBL 2H3细胞

PANC 327细胞类似产品：：HepG2/C3A细胞、PC-3M IE8细胞、2E8细胞

HEK293细胞类似产品：：U-343-MG细胞、HIMEC细胞、Murine Carcinoma-38细胞

Ramos.2G6.4C10细胞类似产品：：Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞

WERI-Rb1细胞类似产品：：GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞

H-35 Reuber细胞类似产品：：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞

Onda 11细胞类似产品：：SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞

SKNBE2C细胞类似产品：：C17细胞、ECV细胞、JiyoyeP-2003细胞

H1819细胞类似产品：：HEL细胞、NCI-H446细胞、NCI-H1395细胞

SGC-7901/DDP细胞类似产品：：CCD-841CoTr细胞、DHL5细胞、LLCPK1细胞

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P3-X63Ag8.653细胞类似产品：：PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞

HPAF细胞类似产品：：Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞

NCI-SNU-475细胞类似产品：：PANC-02-03细胞、Madison细胞、BHP-10细胞

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SW 626细胞类似产品：：LC-1/sq细胞、HK-2 [Human kidney]细胞、159 PT细胞

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OVCAR3细胞类似产品：：BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞

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HPBALL细胞类似产品：：HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞

Centre Antoine Lacassagne-51细胞类似产品：：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞

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HCC-1419细胞类似产品：：Adeno 293细胞、MCFs细胞、INS-1E细胞

Hs-675-T细胞类似产品：：HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞

MKN 45细胞类似产品：：hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞

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Bat lung细胞类似产品：：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞

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BRL-3A细胞类似产品：：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞

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GM3570细胞类似产品：：HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞

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Ramos (RA 1)细胞类似产品：：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞

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Ramos (RA 1)细胞类似产品：：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞

Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞类似产品：：NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞

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H-378细胞类似产品：：SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞

QBI-293A细胞类似产品：：G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞

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HBZY1细胞类似产品：：VeroE6细胞、Mac-1细胞、LS 174T细胞

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