5-8F:鼻咽癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"5-8F:鼻咽癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

HAEC细胞类似产品：：Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞

Pa17C细胞类似产品：：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞

Jijoye细胞类似产品：：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞

PNT1A细胞类似产品：：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

5-8F:鼻咽癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

SKml2细胞类似产品：：P3/X63-Ag8细胞、C-32细胞、MOLM16细胞

NCI-H345细胞类似产品：：MOVAS-1细胞、MAC1细胞、K-1735细胞

TE-7细胞类似产品：：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

5-8F:鼻咽癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长特性：贴壁生长　

传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。

VMRC-LCD细胞类似产品：：M059K细胞、NBL-S细胞、NCI-H1522细胞

LAN-1细胞类似产品：：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞

SK-N-BE2C细胞类似产品：：MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞

A549/DDP细胞类似产品：：NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞

U-251MG细胞类似产品：：SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞类似产品：：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞

COLO320DM细胞类似产品：：GC-1spg细胞、HFF细胞、HEL 92.1.7细胞

SW 756细胞类似产品：：G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞

IM 9细胞类似产品：：3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞

BGC823细胞类似产品：：KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞

U-937细胞类似产品：：MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞

V 79-4细胞类似产品：：FHs 74 Int细胞、K 562细胞、AU-565细胞

HFLS-RA细胞类似产品：：Evsa-T细胞、J774 A.1细胞、RAW 264.7细胞

16HBE细胞类似产品：：MC38细胞、RASMC细胞、SNB.19细胞

R-1059-D细胞类似产品：：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞

HB 611细胞类似产品：：RPMI #1846细胞、CAL12T细胞、H2405细胞

HB 611细胞类似产品：：RPMI #1846细胞、CAL12T细胞、H2405细胞

118MG细胞类似产品：：SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞

D-341Med细胞类似产品：：MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞

H.Ep. No. 2细胞类似产品：：RBL 2H3细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞、OVCAR8/ADR细胞

MDA1386细胞类似产品：：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞

UPCI-SCC-154细胞类似产品：：C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞

COR-L51细胞类似产品：：C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞

NK92细胞类似产品：：HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞

5-8F:鼻咽癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Glioma-261细胞类似产品：：BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞

MESSA/Dx5细胞类似产品：：KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞

OV-CA 432细胞类似产品：：KLM-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞、OP-9细胞

HANK细胞类似产品：：BJAB-1细胞、HCT/FU细胞、SUP-B1细胞

SNU182细胞类似产品：：U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞

H1155细胞类似产品：：HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞

WM115F细胞类似产品：：WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞

HPASMC细胞类似产品：：SW780细胞、Hs-600-T细胞、PAMC82细胞

NCI-157细胞类似产品：：KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞

V79-GalK1细胞类似产品：：GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞

P3X63Ag8-6-5-3细胞类似产品：：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞

HEK293-H细胞类似产品：：SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞

HUT 28细胞类似产品：：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞

PSN-1细胞类似产品：：BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞

NCI-H1404细胞类似产品：：THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞

TE 85.T细胞类似产品：：BE(2)M17细胞、RPTEC/TERT1细胞、GA-10 (Clone 4)细胞

NCI.H226细胞类似产品：：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞

LNCaP FGC细胞类似产品：：H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞

U-343 MG细胞类似产品：：MGH-U3 (RN)细胞、H735细胞、H1385细胞

hTERT-HME1细胞类似产品：：A-673细胞、COLO 320 HSR细胞、NL-20细胞

BTI-Tn-5B1-4细胞类似产品：：RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞

HO-8910细胞类似产品：：H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞

P3J HR-1细胞类似产品：：GM02219C细胞、NCI.H23细胞、MDA-MB-231-luc细胞

MADISON LUNG TA-109细胞类似产品：：PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞

Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞类似产品：：MDA-PCa-2b细胞、HT-22细胞、293FT细胞

H-1648细胞类似产品：：OVCAR-3细胞、MLMEC细胞、CPA47细胞

CMT 93细胞类似产品：：FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞

L-6细胞类似产品：：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞

QBI-293A细胞类似产品：：G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞

TE32细胞类似产品：：NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞

LL2细胞类似产品：：UMNSAH-DF 1细胞、HL-60细胞、SW 1116细胞

MDA-MB-435S细胞类似产品：：Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞

A375细胞类似产品：：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞

Caco 2细胞类似产品：：HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞

NPA 87细胞类似产品：：L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞

EBTr细胞类似产品：：RWPE2细胞、U-251MG细胞、RBL.2H3细胞

SF-539 BT细胞类似产品：：SCL1细胞、IMCD3细胞、HEI-193细胞

SK-N-BE2C细胞类似产品：：MDA-MB468细胞、HL60细胞、HCC-1187细胞

ZR751细胞类似产品：：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞

TFK-1细胞类似产品：：PNT1A细胞、MES-SA-Dx5细胞、MDA PCa 2b细胞

Helacyton gartleri细胞类似产品：：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞

MILE SVEN 1细胞类似产品：：AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞

B-cell with DC Morphology细胞类似产品：：SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞

A549/DDP细胞类似产品：：NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞

COS-7细胞类似产品：：U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞

H-146细胞类似产品：：HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞

CDC/EU.HMEC-1细胞类似产品：：NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞

J774.A1细胞类似产品：：DMS114细胞、UMR 106细胞、RGC-6细胞

CAL62细胞类似产品：：H-2405细胞、NCI-H-82细胞、AgC11x3A细胞

NCIADR.RES细胞类似产品：：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞

SC细胞类似产品：：DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞

CEM/C1细胞类似产品：：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞

NCI-H23细胞类似产品：：HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞

HLE B-3细胞类似产品：：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞

RIN-14B细胞类似产品：：Uhth-74细胞、TE11细胞、TE10细胞

HT-1080细胞类似产品：：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞

MH-S细胞类似产品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞

U251-MG细胞类似产品：：Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞

U251-MG细胞类似产品：：Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞

BNL-CL.2细胞类似产品：：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞

RPMI 2650细胞类似产品：：JIMT细胞、HuLEC-5a细胞、H-735细胞

VP 267细胞类似产品：：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、ELD-1细胞、GM03190细胞

CHAGOK1细胞类似产品：：Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞

J774 A.1细胞类似产品：：SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞

NCI-H1993细胞类似产品：：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞

Malme-3M细胞类似产品：：NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞

AML-2细胞类似产品：：OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞

COLO 320DM细胞类似产品：：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞

J45.01细胞类似产品：：H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞

LX-2细胞类似产品：：MDA-MB-435S细胞、OVCA433_Bast细胞、GM04678细胞

MV4;11细胞类似产品：：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞

Ramos.G6.C10细胞类似产品：：MC-3T3细胞、ONS-76细胞、HUC细胞

S180细胞类似产品：：SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞

T-47-D细胞类似产品：：BTI-TN5B1-4细胞、Panc_08_13细胞、KMST6细胞

Hs888T细胞类似产品：：C4 I细胞、LPC-H12细胞、GOS3细胞

Sp 2/0-Ag 14细胞类似产品：：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞

MFE 280细胞类似产品：：C57 Mouse Tumor 64细胞、SK ES 01细胞、HCC-1833细胞

A-375SM细胞类似产品：：HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞

Me Wo细胞类似产品：：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞

Mv1.Lu细胞类似产品：：MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞

C-28/I2细胞类似产品：：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞

B-cell with DC Morphology细胞类似产品：：SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞

5-8F:鼻咽癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

JG细胞类似产品：：SCC9细胞、High5细胞、MFE-296细胞

NCIH520细胞类似产品：：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞

T/GHA-VSMC细胞类似产品：：SGC-7901细胞、NCIH441细胞、KOSC2细胞

PC 61 5.3细胞类似产品：：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞

HG2855细胞类似产品：：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞

HCT-GEO细胞类似产品：：SF 126细胞、H460细胞、NALM6细胞

"