RM-1:小鼠前列腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"RM-1:小鼠前列腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

SK LU 1细胞类似产品：：EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞

SW839细胞类似产品：：RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞

CBRH7919细胞类似产品：：CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞

H2073细胞类似产品：：253J B-V细胞、CSQT-2细胞、McA-RH8994细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：前列腺癌；C５７BL/６

RM-1:小鼠前列腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

P3X63 AG 8.653细胞类似产品：：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞

Duke University 145细胞类似产品：：M619细胞、D-283 Med细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞

WSU-DLCL-2细胞类似产品：：UWB1.289+BRCA1细胞、MuM-2C细胞、H.Ep.-2细胞

购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

C8-D1A细胞类似产品：：MN9D细胞、CCRF CEM细胞、CSQT-2细胞

SUM149-PT细胞类似产品：：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞

LS174T细胞类似产品：：Rat Lung-65细胞、Ra #1细胞、P3/X63/Ag8细胞

HFL 1细胞类似产品：：MIA Paca2细胞、Panc 04.03细胞、HCC-1937细胞

SF 539细胞类似产品：：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞

KU 812细胞类似产品：：A9 (Hamprecht)细胞、SK-MEL-28细胞、SKUT-1细胞

QGP1细胞类似产品：：NCI-H220细胞、MT-2J细胞、LS-180细胞

HRA-19细胞类似产品：：NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞

KASUMI1细胞类似产品：：9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞

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SKO3细胞类似产品：：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞

3AO细胞类似产品：：TH1细胞、H711细胞、RN细胞

SNU-182细胞类似产品：：B-104细胞、Hep 3B细胞、MDA-MB-175细胞

MNNG/HOS Clone F-5细胞类似产品：：SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞

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H1435细胞类似产品：：Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞

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M210B4细胞类似产品：：BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞

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M619细胞类似产品：：H498细胞、Psi2-DAP细胞、NCI-H1568细胞

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3T3-F442A细胞类似产品：：rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞

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Caki-2细胞类似产品：：SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞

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MDA-MB-453细胞类似产品：：H-2444细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞、HS-729细胞

SKRC20细胞类似产品：：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞

L-428细胞类似产品：：NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞

RPMI-8402细胞类似产品：：SuperTube细胞、ABE­8.1/2细胞、HDMEC细胞

COLO678细胞类似产品：：P30 OHK细胞、PANC403细胞、H9细胞

NTERA-2/D1细胞类似产品：：RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞

RM-1:小鼠前列腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

TE7细胞类似产品：：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞

NCI-H2107细胞类似产品：：MCF-7/ADR-RES细胞、COLO206F细胞、K422细胞

BNCL-2细胞类似产品：：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞

MV4II细胞类似产品：：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞

GS9L细胞类似产品：：Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞

A-427细胞类似产品：：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞

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