WM239A:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

"WM239A:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

SUSM1细胞类似产品：：SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞

Emory University-2细胞类似产品：：ME 180细胞、MDA-MB-157细胞、HIT clone T15细胞

H-2405细胞类似产品：：Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞

MCF-12A细胞类似产品：：LSC-1细胞、SKHEP-1细胞、EB-2细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：黑色素瘤；女性

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细胞形态：上皮细胞样

L-M[TK-]细胞类似产品：：FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞

TSU-Pr1细胞类似产品：：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞

786O细胞类似产品：：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞

细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握HAO细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性HAO，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点，要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

HK-2 [Human kidney]细胞类似产品：：University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞

MLOY4细胞类似产品：：PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞

DF1细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞

RCC4细胞类似产品：：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞

SU86_86细胞类似产品：：HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞

HEL92.1.7细胞类似产品：：MLMEC细胞、MDA157细胞、GM05372细胞

143 B细胞类似产品：：NCI-SNU-407细胞、ARO-81细胞、SKM-1细胞

RS411细胞类似产品：：NT2-D1细胞、LAN-5细胞、HEK293-FT细胞

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UWB1289细胞类似产品：：A 2780 CP细胞、Panc_05_04细胞、NCIH2081细胞

LAN6细胞类似产品：：TE-8细胞、AD-293细胞、U373细胞

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MDA-MB-175细胞类似产品：：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞

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TOV-112细胞类似产品：：SW-626细胞、RWPE2细胞、RCSMC细胞

Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞类似产品：：NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞

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Human Hepatocyte Line 5细胞类似产品：：COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞

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Balb/3T3-4-Cl31细胞类似产品：：PL-5细胞、Tb1.Lu细胞、CHG5细胞

NCI-H1688细胞类似产品：：MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞

PLCPRF5细胞类似产品：：SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞

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D-341Med细胞类似产品：：MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞

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WM239A:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Lu-165细胞类似产品：：HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞

OVTOKO细胞类似产品：：RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞

HPBALL细胞类似产品：：HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞

Human Microglia Clone 3细胞类似产品：：HCC2108细胞、SCL2细胞、32Dcl3细胞

GM12878细胞类似产品：：KM-12细胞、COR-L26细胞、HDLM2细胞

ChaGo-K-1细胞类似产品：：Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞

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