"WRL 68:人正常肝复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A7r5细胞类似产品::SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞类似产品::NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞类似产品::SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
Panc 1细胞类似产品::PA317细胞、TE5细胞、OCI-Ly01细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:胚胎;肝细胞
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细胞形态:上皮细胞样
NCC-IT细胞类似产品::NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
FHs74Int细胞类似产品::D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞
HOS/MNNG细胞类似产品::H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞培养中常用设施及设备:实验室设计:细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备:1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间:一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室:显微镜、计算机及打印机等。
EA.hy 926细胞类似产品::RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞
OVCA432_Bast细胞类似产品::NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞
87 MG细胞类似产品::Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
KYSE 180细胞类似产品::H2108细胞、OVCAR-8细胞、SBC-3细胞
SUM190细胞类似产品::SW 780细胞、JURKAT E-61细胞、SCC15细胞
Hs281T细胞类似产品::HBdSMC细胞、T9细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞
Okayama University Medical School-27细胞类似产品::EHEB细胞、HT 1080.T细胞、2008细胞
HCS2/8细胞类似产品::SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞
SCC-9细胞类似产品::Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
NCI-H69C细胞类似产品::SK.MEL.28细胞、KNS42细胞、HEK;293细胞
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Helacyton gartleri细胞类似产品::HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
EBNA293细胞类似产品::HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞
AC29细胞类似产品::HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
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NCI-441细胞类似产品::SGC-996细胞、HCC-1569细胞、A 253细胞
OCI Ly1细胞类似产品::NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
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KYSE-270细胞类似产品::MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞
Sc-1细胞类似产品::RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞
COLO-357细胞类似产品::SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞
KYSE 410细胞类似产品::ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞
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HCC1359细胞类似产品::SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞
X63-Ag8.653细胞类似产品::LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
Potorous tridactylus Kidney 2细胞类似产品::KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞
Y3-Ag 1.2.3细胞类似产品::0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞
LoVo细胞类似产品::KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞
P3-X63.Ag8.653细胞类似产品::MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞
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NIH:OVCAR-3细胞类似产品::Super Tube细胞、HDLM-2细胞、IMR32细胞
QGP1细胞类似产品::NCI-H220细胞、MT-2J细胞、LS-180细胞
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Jiyoye(P-2003)细胞类似产品::Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
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GOS3细胞类似产品::NCIH660细胞、H-28细胞、LAN-1细胞
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MKN1细胞类似产品::MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞
HTori3细胞类似产品::GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞
SW 780细胞类似产品::Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
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BN-CL2细胞类似产品::SW-1271细胞、OCI/AML-4细胞、Calu-3细胞
RSC 96细胞类似产品::Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
RSC 96细胞类似产品::Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
B16 BL6细胞类似产品::KOSC2细胞、HeLa/S3细胞、Jurkat-77细胞
SK Mel 1细胞类似产品::OVCAR 5细胞、MUG-Chor1细胞、SW-579细胞
L1210细胞类似产品::HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
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AR4-IP细胞类似产品::S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
Bac12F5细胞类似产品::RERF-LCMS细胞、WEHI 164细胞、H-28细胞
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SUDHL-5细胞类似产品::MX-1细胞、NCI-H929细胞、SKml2细胞
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SMMC 7721细胞类似产品::EBNA293细胞、NCIH1792细胞、H2347细胞
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Panc02-H0细胞类似产品::PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
KYSE-450细胞类似产品::MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞
MGHU3细胞类似产品::MOLT.4细胞、WM-115细胞、NCIH1963细胞
ssMCF-7细胞类似产品::NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
HSC6细胞类似产品::HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
OCI-Ly 8细胞类似产品::K562/ADP细胞、MOLT3细胞、MDA-MB-436细胞
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关键字: WRL 68:人正常肝复苏细胞(提供ST;
上海冠导生物工程有限公司,先后从ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等国内外细胞库引进细胞2000余株。以此为契机,公司组建了冠导细胞库,我司细胞均由资深细胞培养工程师进行培养。我司可以提供的细胞有:①细胞系②原代细胞③稳转株④耐药株⑤标记细胞⑥细胞配套试剂等。