LTEP-sm:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

BALL-1细胞类似产品：：HepG2细胞、SACC-LM细胞、LCLC-103H细胞

Michigan Cancer Foundation-7细胞类似产品：：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞

NCI-H1341细胞类似产品：：SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞

253J细胞类似产品：：GM3569细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞、RT4P细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：小细胞肺癌；男性

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细胞形态：上皮细胞样

NCI-H929细胞类似产品：：S3-HeLa细胞、Glioma 261细胞、NCI-H865细胞

LMH细胞类似产品：：SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞

C3H10T1/2CL8细胞类似产品：：SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞

细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升GAO到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。

GM04671细胞类似产品：：HONE-1细胞、Karpas-299细胞、H735细胞

BC3H-1细胞类似产品：：769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞

SGC7901细胞类似产品：：Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞

U-CH1细胞类似产品：：CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞

Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞类似产品：：SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞

T241细胞类似产品：：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞

Hep G2/C3A细胞类似产品：：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞

F56 [Human neoplasm]细胞类似产品：：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞

Be Wo细胞类似产品：：MDAMB330细胞、LNCaP C4-2B细胞、IMR-32细胞

SKUT1细胞类似产品：：Tn5 B1-4细胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、HepG2细胞

HCA-7细胞类似产品：：VP267细胞、Hep G2-Luc细胞、PBL细胞

WM-2664细胞类似产品：：Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞

Hs 742.T细胞类似产品：：High5细胞、H-1435细胞、B16 subline B78细胞

Ly3细胞类似产品：：NCI-H295R细胞、MDA-MB-330细胞、LLC-WRC 256细胞

MHCCLM3细胞类似产品：：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞

Hs675T细胞类似产品：：A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞

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CX-1细胞类似产品：：MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞类似产品：：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞

Sup T-1细胞类似产品：：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞

ZR7530细胞类似产品：：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞

EB2细胞类似产品：：CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞

EBNA293细胞类似产品：：HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞

HL-60细胞类似产品：：Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞

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LLC-PK1细胞类似产品：：TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞

NCI H747细胞类似产品：：NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞

PFSK细胞类似产品：：NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞

RPMI 2650细胞类似产品：：JIMT细胞、HuLEC-5a细胞、H-735细胞

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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞类似产品：：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞

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MDA 435细胞类似产品：：SP2细胞、TB1 Lu细胞、P 815细胞

Tn5B1-4细胞类似产品：：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、HCC-1359细胞、Swiss 3T6细胞

SGC7901细胞类似产品：：Daoy细胞、ECC12细胞、NCIH2171细胞

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BRL3A细胞类似产品：：WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞

SK UT 1细胞类似产品：：SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞类似产品：：Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞

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SW1116细胞类似产品：：KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞

SUP-M2细胞类似产品：：SW1271细胞、D283MED细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞

IHC-ST1细胞类似产品：：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞

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SNU-119细胞类似产品：：HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞

CMT64细胞类似产品：：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞

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H211细胞类似产品：：UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞

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SKLU1细胞类似产品：：BTI-Tn-5B1-4细胞、H2085细胞、CNE2细胞

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RIN14B细胞类似产品：：CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞

SHEP1细胞类似产品：：SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞

NCIH2106细胞类似产品：：GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞

P3-X63-Ag8-6-5-3细胞类似产品：：JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞

Ramos 2G6.4C10细胞类似产品：：NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞

CHO-Lec1细胞类似产品：：H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞

NS1细胞类似产品：：H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞

MCF12A细胞类似产品：：EST50细胞、NCI-SNU-C2B细胞、GC-2细胞

MEG01细胞类似产品：：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞

CCC-HSF-1细胞类似产品：：McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞

RMG1细胞类似产品：：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞

CAKI 2细胞类似产品：：RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞

NCI-HUT-520细胞类似产品：：P3J HR-1细胞、RS(4;11)细胞、MF2059细胞

NCIH647细胞类似产品：：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞

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NCIH1688细胞类似产品：：NCI-H23细胞、AGS细胞、786-0WT细胞

REC-1细胞类似产品：：NCI-H-82细胞、MDA-MB 361细胞、SY5Y细胞

SNU-5细胞类似产品：：SKLU01细胞、HCT_116细胞、KYSE-50细胞

U138细胞类似产品：：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞

ECV细胞类似产品：：S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞

Mel-624细胞类似产品：：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞

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