细胞计数试剂盒
一、产品简介。
Cell Counting Kit-8,简称 CCK-8,主要成份是四唑盐 WST-8,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的 formazan,其颜色深浅程度与细胞数量呈正比。因此,CCK-8 试剂常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等实验。
二、运输与存储条件。
本产品低温运输,-20 ℃保存,有效期 12 个月,使用时存放在 4 ℃,1 个月内用完。
三、特点与优势。
1. 本试剂为即用型试剂,直接加入细胞培养液中即可使用。
2. 本试剂经脱氢酶作用产生水溶性的 formazan,使培养液变成橙黄色,可以直接测定其 OD 值。
3. CCK-8 细胞毒性低,加入细胞培养液后可在不同时间点连续测定培养液的 OD 值。
四、使用说明。
1. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞,计数后接种于 96 孔板,培养液体积为 100 μL/孔。
2. CCK-8 孵育。在细胞培养液中加入 CCK-8 试剂,10 μL/孔,轻轻震荡,混匀,继续培养。
3. 吸光度值检测。CCK-8 加入后不同时间点(1h,2h,4h),利用酶标仪检测 450 nm 处吸光度值(OD 值)。
4. 细胞存活率计算:
细胞存活率 (%)=[A(加药)-A(空白)]/A(对照)-A(空白)]×100
A(加药):药物处理细胞的吸光度值
A(空白):利用培养液作为空白对照孔的吸光度值。
A(对照):正常生长细胞的吸光度值
五、注意事项。
1. 如果吸光度值偏低则适当延长 CCK-8 孵育时间。
2. 测定吸光度值前应确保孔内没有气泡,否则吸光度值会异常。
3. 若无 450 nm 滤光片,可以使用 420-480 nm 的滤光片。
关键字: 细胞计数试剂盒;CCK-8;
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