B16-F1 Cells|小鼠黑色素瘤需消化细胞系

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细胞形态：上皮细胞样

细胞生长：贴壁

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

UPCI-SCC-154Cells;细胞背景资料：舌鳞癌；男性；HPV６转化;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：C-28/I2Cells、NCIH209Cells、WM-115细胞

UPCI-SCC-154Cells;细胞背景资料：舌鳞癌；男性；HPV６转化;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：C-28/I2Cells、NCIH209Cells、WM-115细胞

OV2008Cells;细胞背景资料：宫颈鳞癌；女性;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：NS1-Ag4/1Cells、HRC-99Cells、NCI-H727细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞传代方法：１：２传代

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

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细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

SCC-25Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：３-１：１０传代，２-３天换液１次。;细胞生长特性：贴壁生长;细胞形态特性：上皮Cells;相关细胞有：ZR75-1Cells、HUT 28Cells、RPMI #1846细胞

MAVER-1Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：３-１：５传代；２-３天换液１次。;细胞生长特性：悬浮生长;细胞形态特性：淋巴母Cells;相关细胞有：AML-193Cells、NCI-H2170Cells、SNU-520细胞

WEHI-3Cells;细胞背景资料：白血病；BALB/c;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：悬浮;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：BERH-2Cells、PC-12Cells、SKGT4细胞

细胞生长特性：贴壁生长

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

H498细胞类似产品：：MES-23.5细胞、NCI-H676细胞、Mel-MeWo细胞

RGC-6细胞类似产品：：RPMI7666细胞、RKO-AS45-1细胞、RCC10 RGB细胞

ADR-RES细胞类似产品：：SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞

hMSC-BM细胞类似产品：：YT细胞、FAO-1细胞、NCIH1755细胞

DK-MG细胞类似产品：：CAL-12T细胞、NRCC细胞、OCI-LY-18细胞

K1735细胞类似产品：：C3H 10T1/2细胞、Hs 742.T细胞、LI7细胞

SCC4细胞类似产品：：COLO 201细胞、SMA 560细胞、Pt K2细胞

NIH:OVCAR-8细胞类似产品：：X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞

SKGT4细胞类似产品：：BEND细胞、HCC15细胞、CCRF SB细胞

VMRC-LCD细胞类似产品：：M059K细胞、NBL-S细胞、NCI-H1522细胞

LICR-LON-HN6-R细胞类似产品：：751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞

Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞类似产品：：H-1623细胞、H-719细胞、OVSAHO细胞

NCTC1469细胞类似产品：：SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞

HepG2-luc细胞类似产品：：SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞

HepG2-luc细胞类似产品：：SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞

PL9细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-78细胞、CAKI1细胞、MDA-MB-231-GFP细胞

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AHH-1细胞类似产品：：Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞

FTC-133细胞类似产品：：SNU-C1细胞、SNU-251细胞、NSC34细胞

NCIH1436细胞类似产品：：RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞

OCILY-19细胞类似产品：：HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞

COR-L26细胞类似产品：：EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞

BNL-CL.2细胞类似产品：：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞

KYSE270细胞类似产品：：2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞

SK-ES细胞类似产品：：LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞

NRK 52E细胞类似产品：：OVCAR8细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞、GC-1细胞

Panc-08.13细胞类似产品：：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞

Immortal Pig Intestinal-2I细胞类似产品：：CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞

HEEpiC细胞类似产品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞

Oregon J-111细胞类似产品：：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞

ECC12细胞类似产品：：HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞

PLA-801D细胞类似产品：：THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞

Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞类似产品：：H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞

SV-HUC细胞类似产品：：AD-293细胞、231-luc细胞、NCM356细胞

DI TNC-1细胞类似产品：：MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞

TNC-1B12B4细胞类似产品：：Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞

COLO 680NCells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：SVG(P12)Cells、J45.01Cells、5637细胞

SNU449Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：５-１：１０传代；每周２-３次;细胞生长特性：贴壁生长;细胞形态特性：上皮样；多角形;相关细胞有：BNL 1MEA.7R.1Cells、NCI-H1975Cells、HUC-1细胞

CTX TNA2Cells;细胞背景资料：星形胶质Cells;SV４０转化；SD;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：JB-6 Cl 30Cells、USMCCells、C-32细胞

UWB1.289+BRCA1Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２传代;细胞生长特性：贴壁生长　;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：Capan 1Cells、MDA-MB-435Cells、SUM149细胞

FL-83BCells;细胞背景资料：肝；自发永生；C５７BL/６J;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：SW954Cells、Hi-5Cells、MDA175细胞

L cells (TK-)Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：Karpas 422Cells、H1882Cells、OV-CA 432细胞

32Dcl3Cells;细胞背景资料：骨髓淋巴瘤；C３H/HeJ;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：悬浮;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：NIH3T3Cells、A 2780 CPCells、WPMY-1细胞

DHL-4Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：悬浮;细胞形态特性：淋巴母Cells;相关细胞有：NTHY-ORI3.1Cells、Panc-813Cells、H2110细胞

T-98GCells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：按１：３传代;细胞生长特性：贴壁生长;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：COLO 320DMCells、TC7Cells、MV-522细胞

L-cellsCells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：UPCI-SCC-090Cells、HCT 116Cells、Hopkins-92细胞

Mono Mac6Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２传代;细胞生长特性：悬浮生长;细胞形态特性：淋巴母Cells;相关细胞有：138 MGCells、KATOIIICells、SCC-9细胞

G-402Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：６传代，每周２-３次。;细胞生长特性：贴壁生长;细胞形态特性：上皮细胞样;相关细胞有：FU-MMT-1Cells、NCI-H2141Cells、MGH-U1 (EJ)细胞

RMCCells;细胞背景资料：肾系膜;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：NBL-2Cells、NCI-H1355Cells、Hs343T细胞

RMS13Cells;细胞背景资料：肺泡横纹肌肉瘤；骨髓转移;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：WM115-melCells、P3 NS1 Ag4Cells、SP2细胞

BCECsCells;细胞背景资料：脑；毛细血管；内皮Cells;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：PANC403Cells、MCF-7/ADR-RESCells、MDA-MB 468细胞

Panc 3.27Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２传代;细胞生长特性：贴壁生长;细胞形态特性：上皮样;相关细胞有：J774Cells、P3JHR-1Cells、HS852.T细胞

Colo699Cells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：H-2330Cells、H-661Cells、HCT116/L细胞

Neuro-2aCells;细胞背景资料：详见相关文献介绍;细胞传代方法：１：２-１：４传代；２-３天换液１次;细胞生长特性：贴壁生长;细胞形态特性：详见细胞说明书;相关细胞有：HBSMCCells、IOSE80Cells、Madin Darby Bovine Kidney细胞

SPCA-1细胞类似产品：：Hs-688A-T细胞、BC-020细胞、CAL62细胞

MUTZ1细胞类似产品：：P3-X63Ag8细胞、Human Epithelioma-2细胞、HITT15细胞

FUOV1细胞类似产品：：COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞

Hs746T细胞类似产品：：CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞

GM05862细胞类似产品：：H-1404细胞、Hs695T细胞、OVCA-433细胞

BALB/3T3 cl. A31细胞类似产品：：RCK-8细胞、HEK 293-F细胞、CTV-1细胞

Alexander cells细胞类似产品：：HEK 293 c18细胞、M2-10B4细胞、CAL 85-1细胞

H358细胞类似产品：：P3/NS1/1-Ag4.1细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、ACC-2细胞

OCI-Ly18细胞类似产品：：HCC9724细胞、C-643细胞、LoVo细胞

SK-RC 39细胞类似产品：：TE-15细胞、HT1080细胞、NCI.H23细胞

HH [Human lymphoma]细胞类似产品：：NCIH1184细胞、H-1882细胞、C2A细胞

SK Mel 24细胞类似产品：：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞

MDA453细胞类似产品：：EMT-6细胞、CEM clone 7细胞、P3/X63-Ag8细胞

HP615细胞类似产品：：Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞

NCIH1944细胞类似产品：：KMM1细胞、H295R-S1细胞、HCC9204细胞

LA795细胞类似产品：：Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞

H1341细胞类似产品：：T47D:A细胞、TE354.T细胞、H-1666细胞

SW962细胞类似产品：：A375.S2细胞、HTR-8/SVneo细胞、3T6-Swiss albino细胞

STTG1细胞类似产品：：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞

HuCCT-1细胞类似产品：：T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞

C32 [Human melanoma]细胞类似产品：：T/GHA-VSMC细胞、WC00097细胞、SCC-15细胞

H-125细胞类似产品：：U937细胞、MV4II细胞、P388细胞

H-2107细胞类似产品：：rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞

TE-13细胞类似产品：：Jurkat clone A3细胞、HOS (TE85)细胞、NRK细胞

3T3-Swiss albino细胞类似产品：：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞

SMA560细胞类似产品：：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞

H847细胞类似产品：：FRO细胞、Huh 7.5.1细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞

NBL-1细胞类似产品：：LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞

RH30SJ细胞类似产品：：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞

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WiDrTC细胞类似产品：：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞

KYSE 50细胞类似产品：：HeLa S3细胞、HM1900细胞、Huh7.5.1细胞

Douglas Foster-1细胞类似产品：：NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞

H920细胞类似产品：：HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞

CL1.0细胞类似产品：：COR-L 105细胞、P-19细胞、MDA-MB 468细胞

SK-MES1细胞类似产品：：G519细胞、CCRFCEM细胞、TE 85.T细胞

H460细胞类似产品：：Karpas 299细胞、CCD1112Sk细胞、C2C12细胞

CCRF/CEM/0细胞类似产品：：YD15细胞、KCL22S细胞、D-324MED细胞

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