一、Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)
组份浓度:1 M Tris-HCl
配制量:1 L
配制方法:
1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解
3. 加入浓盐酸调节所需要的pH值
4. 将溶液定容至1 L
5. 高温高压灭菌后,室温保存
二、1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
组份浓度:1.5 M Tris-HCl
1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8
Tris-HCl缓冲液的优点:
1.因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;
2.对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
Tris-HCl缓冲液的缺点:
1.缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;
2.温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,即:
△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。
3.易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。
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