TMRM是荧光探针(激发,530±21nm;发射,592±22nm)。存在番红花素或TMRM时的荧光信号在加入谷氨酸后显示略微降低,表明线粒体内膜的极化增加。在存在TMRM(2μM)的情况下,与复合物I底物或加入复合物II底物的偶联呼吸减少了27%[1]。将海马培养物暴露于低浓度TMRM(50至500nM)1至3小时导致神经元和潜在神经胶质细胞中线粒体的选择性染色。将海马培养物暴露于高浓度的TMRM(1至25μM),选择性且快速地染色线粒体,在5至10分钟后达到平台期。低浓度的TMRM(50至200 nM)不会诱导细胞凋亡,而较高浓度(0.5和2.5μM)会增强细胞凋亡(KD = 500 nM)。
中文名:四甲基罗丹明甲酯(TMRM)
英文名:Tetramethylrhodamine
TMRM
CAS:115532-49-5
分子式:C25H25N2O3
分子量:436.93
纯度:≥98%
结构式:
溶解性:可溶于二甲基亚砜和乙醇
储存温度:2-8°C储存,避光,干燥
运输条件:冰袋运输
生化机理:荧光的可渗透细胞的阳离子染料,用于测量线粒体膜电位。积累在健康的,带负电荷的线粒体中。展品重新发出橙色荧光(Em = 573 nm)。
细胞实验:将培养物暴露于含有TMRM的Millipore过滤溶液(0.22μm)在37℃下1小时(除了涉及暴露于TMRM的不同持续时间的实验外)。处理后,除去溶液并在无菌条件下重新施用生长培养基,并将培养物在37℃下后孵育18小时(实验涉及暴露后不同时间点的分析)。然后将细胞在室温下用2mg / mL双苯甲酰亚胺染色20分钟。随后用盐水洗涤盖玻片并使用2P显微镜成像。在UV激发下,凋亡细胞被鉴定为明亮的荧光核,表明DNA片段化。细胞存活率计算为每次处理的5个显微镜视野中活的未染色细胞的百分比(±SD)
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