血糖含量试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
哺乳动物血液中的葡萄糖称为血糖,是其体内糖的主要运输形式。血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定,调节失衡时出现高血糖和低血糖。糖尿病、颅内压增加和脱水症等均可引起高血糖;饭后,精神紧张也可出现生理性高血糖。相反,胰岛β细胞增生或肿癌等,垂体、肾上腺皮质和甲状腺功能减退,以及严重肝病患者均可出现低血糖症状。此外,饥饿和剧烈运动可引起暂时的低血糖。
血糖含量试剂盒测定原理:
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:0.5mmol/L葡萄糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体 25ml×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体 25ml×1瓶,4℃保存;(若出现结冰现象,可37℃水浴溶解后使用)
血糖含量试剂盒测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。
2、混合试剂的配制:使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合,用多少配多少。
3、加样表(在EP管中加入下列试剂):
试剂名称(μL) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
血清 |
|
| 100 |
试剂一 |
| 100 |
|
蒸馏水 | 100 |
|
|
混合试剂 | 900 | 900 | 900 |
混匀,置37℃水浴中,保温15min,于505nm波长处读取吸光度A。空白管、标准管和测定管吸光值分别记为A1、A2和A3。空白管和标准管只要做一管。
血糖含量计算:
血糖含量(μmol/mL)= C标准×(A3-A1)÷(A2-A1)=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)
C标准:标准管浓度,0.5µmol/mL。
注意:
1、 最低检测限为1nmol/mL。
2、若样本中存在葡萄糖氧化酶抑制剂,则会造成测定结果偏低,建议改用HPLC法测定。
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