人 T 细胞白血病细胞 MT-4产品基本信息
细胞名称:MT-4 ,人 T 细胞白血病细胞
规格:1×106cells/T25或1mL冻存管
细胞货期现货,1周左右
种属来源:人
组织来源:淋巴细胞
细胞形态:淋巴细胞样
生长特性:悬浮生长
培养基: RPMI-1640+10%FBS+1%PS
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2,每周 2-3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
注意事项:限于科学研究等非医疗目的,不可用于人类或者动物的临床诊断使用
人 T 细胞白血病细胞 MT-4细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3
min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4
mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,然后进行细胞计数。
b、根据细胞数量对应加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.
仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3.
用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞,死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm离心3 min,弃上清。加5 mL PBS重悬细胞,再900
rpm-1000 rpm离心3 min,,用新鲜的完全培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6.
建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后一次传代建议1:2传代
。
9. 注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
悬浮细胞收货注意事项:
1、收货时需镜下拍照(看密度、状态)
2、静置后需镜下拍照(看整体密度)
a.如密度 50%以下,建议换液并竖瓶培养
b.如密度 50%-80%,建议换液培养,隔天观察密度
c.如密度 90%,建议传代
3、换液及传代处理前,培养瓶竖着放置至少半小时(使细胞沉到瓶底);收集上清,必须将
瓶内所有培养基(70ml)全部收集!并用 PBS(10ml)润洗瓶底并收集!离心转速为 1000rpm,
5min。
关键字: MT-4人急性淋巴母细胞白血病细胞(ST;MT-4;MT-4细胞;
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