1.细胞起源:
细胞简称 HK-2
细胞别称 Hk-2; HK2; Human Kidney-2
细胞背景描述 HK-2细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2;Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示,HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实,HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。
供体年龄 成年
组织来源 肾,皮质/近端小管
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
生物安全等级 2
2.培养及保藏:
完全培养基 MEM(含NEAA)(PM150410)+10% FBS(164210-50)+1%
P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.传代方法:
传代步骤
1、吸出原培养液;
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
消化时间 2~3分钟
传代比例(密度) 1:2-1:4
换液频次 2~3次/周
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。