1.细胞起源:
细胞简称 NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1]
细胞别称 NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983
细胞背景描述 NR8383细胞来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞,NR8383细胞在Gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了8-9个月。随后,NR8383细胞不再需要外源生长因子。通过有限稀释法,从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞,并3次用软琼脂亚克隆。NR8383细胞表现出巨噬细胞的特性:吞噬酵母多糖和铜绿、非特异性脂酶活性、Fc受体、氧化降解;分泌IL-1、TNF-β和IL-6,可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应博莱霉素,分泌TNF-β前体。NR8383细胞在博莱霉素刺激下,TNF-β mRNA表达也上升。NR8383细胞对内毒素敏感,1-10ng/ml的LPS水平抑制增生达50%。即使达到0.001mg/ml的水平,LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。NR8383细胞提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源,可以用于体外研究巨噬细胞相关活性,此细胞悬浮-贴壁混合生长。
组织来源 肺;巨噬细胞;肺泡
细胞形态 巨噬细胞样
细胞类型 自发永生化细胞
生长特性 半贴半悬
生物安全等级 1
2.培养及保藏:
完全培养基 Ham's F-12K(PM150910)+20% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.传代方法:
传代步骤
1、该细胞为半贴壁半悬浮细胞,悬浮细胞是活细胞,可用离心管收集细胞悬液后,于1200 rpm(250g左右)离心收集细胞;
2、部分贴壁不牢的细胞可直接吹起使之悬浮;
3、贴壁较牢固的细胞可用PBS润洗后,在培养瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培养箱中消化,待细胞变圆收缩后可用4~6 mL左右完全培养基进行终止消化,轻轻吹散细胞后离心搜集细胞;
4、将悬浮的细胞和贴壁的细胞收集到一起混匀后按比例接种到新的培养瓶。
传代比例(密度) 2×10^5-5×10^5cells/mL
换液频次 2~3次/周
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。