1.细胞起源:
细胞简称 RWPE-1
细胞别称 RWPE1
细胞背景描述 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1细胞株[PubMed:9214605]。在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA[PubMed:11170142]。当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE-1细胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并产生PSA。来源于RWPE-1细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2细胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99细胞株。另外,用N-甲醇-N-硝基脲(MNU)处理RWPE-1细胞,建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。它们是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26细胞株。据提供者报道,RWPE-1细胞经过检测,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。
供体年龄 男;54岁
组织来源 器官:前列腺;疾病:正常;细胞类型:上皮细胞
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
生物安全等级 2
2.培养及保藏:
完全培养基 K-SFM+0.05mg/mL BPE+5ng/mL EGF+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.传代方法:
传代步骤
1、吸出原培养液;
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
传代比例(密度) 1:2-1:4
换液频次 2~3次/周
倍增时间 ~22 hours
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。