1.售前须知:
1. SK-BR-3细胞从冷冻保存中恢复的速度可能很慢。SK-BR-3细胞在低温保存恢复过程中的附着会很轻。这很正常。这种细胞系在培养的整个周以及每次继代培养后都表现出松散的附着和漂浮的细胞,这并不少见; 2. 如果存在大量漂浮物,尤其是在生长的周,在启动复苏后几天内保持细胞不受干扰。如果仍然有很多漂浮物,用台盼蓝检查生存能力。通过轻轻离心保留漂浮细胞,并在更换培养基时将其与附着的细胞一起添加回同一培养容器中,这一点很重要。不要分离或丢弃漂浮细胞。细胞最初以小斑块或细胞群的形式附着,许多细胞团仍处于悬浮状态。几天后,生长将从贴壁细胞群向外延伸。通常也会出现一些细胞碎片。漂浮细胞应始终通过温和离心(125 x g,持续5至7分钟)保留,并在换液或传代后放回培养容器; 3. SK-BR-3细胞倾向于相互堆积。在细胞达到70-80%汇合度之前不要用胰酶消化处理细胞。如果让细胞过度生长,细胞就会分离漂浮。
2.细胞起源:
细胞简称 SK-BR-3 [SKBR3]
细胞别称 SK-Br-3; Sk-Br-3; SK BR 03; SKBR-3; SKBr-3; SK-BR3; SKBr3; SkBr3;SKBR3
细胞背景描述 SK-BR-3 [SKBR3]细胞是由Trempe·G和Old·L·J于1970年从一位43岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离得到的。SK-BR-3 [SKBR3]细胞亚显微结构特征包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝;SK-BR-3 [SKBR3]细胞过表达HER2/cerb-2基因产物。供体年龄 女;43岁
组织来源 乳腺;乳房;肋膜渗出液转移灶
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 乳腺癌细胞
生长特性 贴壁细胞
生物安全等级 1
3.培养及保藏:
完全培养基 McCoy’s 5A(PM150710)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,95%;CO 2,5%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.传代方法:
传代步骤 1、吸出原培养液;
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
消化时间 3~5分钟
传代比例(密度) 1:2-1:4
换液频次 2~3次/周
倍增时间 ~48-72 hours
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。